Проба Кумбса — дослідження, широко застосовується в , для виявлення антитіл прикріплених до поверхні або розчинених у плазмі.
Синоніми: антіглобуліновой тест, Coombs test, AGT, indirect / direct antiglobuline test, IAT, NAT, DAT, indirect / direct Coombs test
Проба Кумбса — це
аналіз, за допомогою якого виявляють иммунизирования і антитіла до еритроцитів.
Види проби Кумбса
- пряма проба Кумбса — визначає антитіла зафіксовані на поверхні еритроцитів. Проводиться при підозрі на , гемоліз при аутоімунних захворюваннях, після прийому ліків (метилдопа, пеніцилін, хінін), після переливання крові і .
Еритроцити були сенсибілізовані in vivo — до них вже міцно прикріплені антитіла, а додавання антіглобуліновой сироватки (анти-IgG) викликає склеювання сенсибілізованих клітин, що і видно неозброєним оком.
- непряма проба Кумбса — виявляє антиеритроцитарні антитіла в плазмі крові, виконують перед переливанням крові і при .
антиеритроцитарних антитіла — різновид аутоантитіл, тобто антитіл проти власних же тканин. Аутоантитіла виникає при патологічної реактивності імунної системи на деякі препарати, наприклад, на високі дози пеніциліну.
Еритроцити на своїй поверхні містять різні хімічні структури (гліколіпіди, цукри , глікопротеїни та протеїни), в медицині іменуються антигенами . Людина успадковує від батьків певну карту антигенів на кожній червоній клітці крові.
Антигени об'єднані в групи і біля цього кров ділять на кілька груп — по системі AB0, резус, Келл, Левіс, Кідд, Даффі . Найвідоміші і значущі в роботі лікаря — AB0 і резус-фактор (Rh).
Система AB0
в антигени (аглютиноген) а і в розташовані на мембрані еритроцита, а в крові циркулюють аглютинінів — альфа -? і бета -?. Аглютинінів при контакті з аглютіногеном призводить до гемолізу, тому можливі такі комбінації:
- тільки ?? — I група крові
- A +? — II група крові
- B +? — III група крові
- A + B — IV група крові
Варіанти A? і B? — Неможливі.
система Rh (резус-система)
резус фактор крові — це складна система, що включає більше 40 антигенів на поверхні оболонки еритроцита, що позначаються цифрами, буквами і символами. Найчастіше зустрічаються резус-антигени типу D (85%), С (70%), Е (30%), е (80%) — вони ж і мають найбільш вираженою антигенностью — здатність стимулювати імунну систему до синтезу антитіл. Система резус не має в нормі однойменних аглютинінів (в плазмі крові), але вони можуть з'явитися, якщо людині з резус-негативною кров'ю перелити резус-позитивну .
Резус-приналежність людини визначається наявністю саме цих антигенів. Особливо важливий антиген еритроцитів — антиген D. Якщо він присутній, то говорять про резус-позитивної крові RhD, а якщо його немає — про резус-негативної Rhd.
Якщо до антигенів еритроцитів приєднається відповідне антитіло, то еритроцит руйнується — гемолізує .
Показання до проведення прямого антіглобуліновой тесту
- первинна аутоімунна гемолітична анемія
- гемолітична анемія при аутоімунних, пухлинних, інфекційних захворюваннях
- лікарська аутоімунна гемолітична анемія
- посттрансфузійні гемолітична анемія (дні — місяці)
Показання до проведення непрямого антіглобуліновой тесту
- перед переливанням крові
- при вагітності резус-негативної жінки
Аутоіммунна гемолітична анемія
Аутоіммунна гемолітична анемія (первинна) — класичне аутоімунне захворювання з невідомими причинами. Припускають порушення в процесі взаємодії на рівні імунної системи, що веде до сприйняття власних еритроцитів як чужих. Клітини продукують антитіла класу IgG (реагують при t 37 ° C) і / або IgM (при t 40 ° C), приєднуючись до поверхні еритроцита запускають ряд ферментів (систему комплементу) і «продірявлюють» стінку еритроцита, що призводить до його руйнування — гемолизу .
Симптоми гемолітична анемія
- втома, загальна слабкість , дратівливість
- задишка
- біль в животі, нудота
- темний колір сечі
- болю вспині
- жовтяничне забарвлення шкіри та слизових оболонок
- збільшення печінки, селезінки
- зниження кількості еритроцитів і в
Позитивний результат прямий проби Кумбса на 100% підтверджує діагноз аутоімунної гемолітичної анемії, доводячи її аутоммунное походження. Одночасно негативний результат — не дає можливості зняти діагноз.
Вторинна автоімунна гемолітична анемія і позитивна проба Кумбса можуть бути при таких захворюваннях:
- синдром Еванса
- інфікування пневмонії
Позитивність антіглобуліновой тесту при даних захворюваннях не служив діагностичним критерієм, а є одним із симптомів захворювання.
Гемолітична хвороба новонародженого
Причина гемолітичної хвороби новонароджених — несумісність груп крові у матері і плоду, в більшості випадків за системою резус, в одиночних — по системі АВ0, казуістичності — за іншими антигенами.
резус-конфлікт розвивається, якщо у резус-негативної жінки плід успадкував від батька резус-позитивну кров.
Захворювання у новонародженого розвивається тільки в тому випадку, якщо мати вже виробила антитіла до відповідних антигенів, що буває після попередніх вагітностей, , абортів, переливання несумісної крові. Найбільш часта причина запуску синтезу антитіл до антигенів еритроцитарної оболонки — пологи (фето-материнське кровотеча). Перші пологи в основному проходять без ускладнень, але от наступні — чреваті гемолітичною хворобою новонародженого в перші дні після народження.
Симптоми гемолітичної хвороби новонародженого
- жовтушність шкіри
- блідість шкіри і слизових
- збільшення печінки і селезінки
- порушення дихання
- набряк всього тіла
- збудження і поступове пригніченняцентральної нервової системи
Анемія після переливання крові
Непряму пробу Кумбса проводять перед переливанням крові для оцінки сумісності, а пряму пробу Кумбса — після нього при підозрі на посттрансфузний гемоліз, тобто . при наявності симптомів, таких як лихоманка, озноб, полив (читай нижче). Мета аналізу — виявити антитіла до перелитим еритроцитів, які зв'язалися з еритроцитами отримав кров і є причиною посттрансфузного гемолізу, а також передчасного видалення донорських еритроцитів з кровообігу у реципієнта (того, хто отримав кров).
Симптоми гемолітичної реакції після переливання крові
- підвищення температури тіла
- висип на шкірі
- болю в спині
- червона
- нудота
- запаморочення
Розшифровка проби Кумбса
Варто нагадати, що принципові правила розшифровки прямого і непрямого антіглобуліновой тесту однакові . Єдина відмінність — розташування антитіл — в крові або вже на червоній клітці крові — на еритроциті.
- якщо пряма проба Кумбса негативна — це значить що на еритроцитах не " сидить »антитіло і причину симптомів потрібно шукати далі і провести непряму пробу Кумбса
- якщо позитивний результат проби Кумбса виявлено після переливання крові, інфекцій, ліків — позитивність може тривати до 3 місяців (час життя еритроцитів 120 днів — 3 місяці)
- позитивний результат антіглобуліновой тесту при аутоімунному захворюванні може тривати місяці інавіть роки
Норми проби Кумбса
- пряма проба Кумбса — негативно
- непряма проба Кумбса — негативно
Якісно позитивний результат вимірюється в кількості плюсів від одного до чотирьох (+, ++ , +++, ++++), а кількісно в цифровому вигляді — 1:16, 1: 256 і т.д.
4 факти про пробі Кумбса
- запропонована вперше в Кембриджі в 1945 році
- поріг чутливості — не менше 300 фіксованих молекул антитіл на одному еритроциті
- число антитіл запускають гемоліз — індивідуально для кожної людини (від 16-30 до 300)
- динаміка інших лабораторних показників гемолітична анемія (гемоглобін, білірубін, ретикулоцити) моженормалізуватися, а проба Кумбса залишиться на тому ж рівні
Недоліки антіглобуліновой тесту
- можна визначити силу зв'язування антигену з антитілом
- невідомо кількість пов'язаних антитіл
- не визначає вид антитіла
- позитивність проби Кумбса не допоможе визначити їїпричину
- 0,5% здорових людей мають позитивну пробу Кумбса без будь-яких ознак гемолітичної анемії
- не підходить для контролю успішності лікування, оскільки не вкаже активність гемолізу еритроцитів
Пробу Кумбса проводять разом з наступними аналізами
- аналіз крові на
- мікроскопія мазка крові
- — (, , , , ), (, , )
- — , ,
Часті питання лікаря
1. Чи можлива передача цих антитіл при донорстві крові?
Ні. При донорство — донор віддає кров, а не отримує, тому немає можливості для появи антитіл.
2. 5-10-20 років тому мені перелили кров, чи варто зараз говорити про це лікаря перед новим переливанням крові?
Так. Про те, що Ви отримали трансфузию крові обов'язково повинен знати Ваш лікар, оскільки вона впливає на правильність розшифровки результатів аналізів зараз. При отриманні чужої (хоч і багато разів перевіреної крові) завжди існує ймовірність того, що ваше тіло виробить антитіла проти перелитої крові. Саме дані антитіла зроблять негативний вплив на стан здоров'я. При наступних переливанні крові лікар повинен знати про те, що Ви вже отримували трансфузии, а значить був час для синтезу антитіл. Для вагітних жінок дана інформація ще більш актуальна.
3. Якщо невідповідність по резус-фактору між матір'ю і дитині, чи будуть хворі всі діти?
Залежить на резус-позитивності або заперечності дитини (RhD). Носії групи крові I, II, III і IV можуть бути як резус-позитивні, так і негативні. У ситуації коли мати резус-негативна, а дитина резус позитивний — антитіла будуть вироблятися вже з першою вагітністю, але тільки після перших пологів (або переривання вагітності) відбудеться прямий контакт крові матері і дитини. Реалізація гемолитического впливу антитіл буде тільки при других і наступних пологах, що призведе до гемолітичної хвороби у новонародженого.
Кожна жінка з негативним резус-фактором повинна бути ретельно обстежена під час вагітності, а після пологів проводиться профілактичне лікування для запобігання виникненню антитіл і подальших ускладнень.
4. Під час вагітності потрібно знати групу крові чоловіка перед проведенням проби Кумбса?
Потрібно не просто знати, але ще і перевірити групу крові біологічного батька дитини під час вагітності.