Визначення кількості еритроцитів в лічильної камері

Одним з перших методів визначення кількості еритроцитів в крові є підрахунок в лічильної камері. Незважаючи на тривалу використання в лабораторній практиці, такий метод дозволяє лаборанту оцінити не тільки кількість еритроцитів, але і їх структуру, діаметр. Поступається аналізу крові на гематологічному аналізаторі .

Метод підрахунку еритроцитів в лічильної камері

Кров попередньо розводять з метою зменшення числа клітин, які підлягають рахунку. В хімічні пробірки відмірюють піпеткою по 4 мілілітра 3% -ного розчину хлориду натрію і обережно видувають в неї 0,02 мілілітра капілярної крові (кров забирають піпеткою від гемометра Салі ). Отримане розведення можна практично прийняти рівним 1: 200. Суспензію ретельно перемішують і потім заповнюють камеру з сітками Горяєва .

Сітка Горяєва складається з 225 великих квадратів (15 х 15). Великі квадрати, розкреслені вертикально і горизонтально на 16 малих квадратів, чергуються з квадратами, розділеними тільки вертикальними або горизонтальними лініями, і з квадратами чистими, без ліній. Глибина камери дорівнює 1/10 міліметра, сторона малого квадрата — 1/20 міліметра, обсяг малого квадрата дорівнює 14 000 міліметрів кубічних.

Перед заповненням камеру і шліфоване покривне скло миють і сушать. Покривне скло притирають до камери так, щоб з'явилися райдужні кільця. Краплю розлученою крові вносять піпеткою під притерте покривне скло камери. Після заповнення камеру залишають на 1-2 хвилини в спокої для осідання формених елементів, потім приступають до підрахунку при малому збільшенні мікроскопа в затемненому полі зору (прикритої діафрагмі і опущеному конденсорі).

Еритроцити вважають в 5 великих квадратах (5 х 16 = 80 малим квадратах), розташованих по діагоналі. Для цього шукають лівий верхній великий розграфлений квадрат, підраховують кількість знаходилися в ньому еритроцитів, потім по діагоналі вниз і направо знаходять наступний такий квадрат і так далі. Для того щоб двічі не злічити одні і ті ж еритроцити, що лежать на прикордонних лініях, дотримуються правило: до даного квадрату належать ті еритроцити, які знаходяться більшою своєю частиною всередині нього, розділені прикордонної лінією.

Вважають тільки еритроцити на верхній і лівої кордоні квадрата.

Кількість еритроцитів в 1 мілілітрі крові розраховують за формулою:

(а * 4000 * 200) / 80

  • а — число підрахованих еритроцитів,
  • 4000 — приведення до обсягу 1 мкл крові,
  • 200 — ступінь розведення,
  • 80 — кількість малих квадратів.

Після скорочення, формула визначення кількості еритроцитів в крові виглядає наступним чином:

(а * 10 000) = млн / л

При взаімосокращеніі виходить твір — а * 10 000, тобто число підрахованих еритроцитів в 5 великих квадратах на 10 000. Помилка методу в середньому дорівнює ± 2,5%.

Даний метод підрахунку еритроцитів займає досить тривалий час — як мінімум 20-30 хвилин.

Найбільш часто зниження кількості еритроцитів відбувається при анеміях . Одночасно знижується кількість гемоглобіну . Підвищення еритроцитів крові буває досить рідко, при значному зневодненні і еритреми.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *