Тканинна рідина (серум) є матеріалом для мікроскопічного дослідження на бліду трепонем при сифілісі .
Твердий шанкр (ерозія або виразка) при , багато висипання (ерозійні папули, широкі кондиломи і т.п.) служать об'єктами для дослідження на бліду трепонем.
у тих випадках, коли твердийшанкр розташовується в недоступних місцях (внутрішньоуретральні шанкр, при ускладненні запальним фімозом і т.д.), А також при виявленні великої кількості несифілітичних трепонем, на бліду трепонем досліджують пунктах ураженого, а саме збільшеного, регіонарного лімфатичного вузла.
До мікроскопічного аналізу на наявність блідих трепонем при підозрі на сифіліс, не повинно проводитися ніякого місцевого лікування і лікування антибіотиками. Якщо на поверхні шанкру є велика кількість відмерлих тканин або сифілітичний шанкр значно забруднений (гній, кров), а також, якщо хлориду на шанкр, а дослідження на бліду трепонем проводиться на наступний день.
Поверхня ерозії або виразки перед мікроскопією при підозрі на сифіліс попередньо очищають від забруднення ватним тампоном, змоченим стерильним фізіологічним розчином натрію хлориду, після чого протирають сухою ватою або марлею.
Потім прокаленной і охолодженої платинової (або вольфрамової) петлею (або лопаткою) погладжують поверхню шанкра ближче до країв, де найбільша ймовірність виявлення блідих трепонем. Через півхвилини або хвилину з'являється серум (сироватка) — жовтувата прозора або злегка опалесціююча рідина. Процедура роздратування проводиться обережно і акуратно. Значна домішка крові в отриманому зразку для мікроскопії на бліду трепонем не допускається, тому що ускладнює, або навіть унеможливлює, пошук збудника сифілісу.
Досліджуваний серум вносять платинової петлею в краплю ізотонічного розчину натрію хлориду на тонкому (товщиною 1, 1-1,2 мм) предметному білому склі, змішують, накривають покривним склом.
Мікроскопічне дослідження препарату на блідітрепонеми проводять в оптичному мікроскопі з темнопольним конденсором, об'єктивом 40, окуляром 10.
перед тим як покласти препарат на столик мікроскопа, на верхню лінзу конденсатора наносять краплю дистильованої води.
Пункцію лімфатичного вузла при підозрі на сифіліс, проводять в лежачому положенні хворого , з дотриманням всіх правил асептики.
Для пункції використовують шприц з короткою товстою голкою. У шприц набирають кілька крапель ізотонічного розчину натрію хлориду. Лімфатичний вузол фіксують між великим і вказівним пальцями лівої руки, а правою рукою вводять в нього голку. Потім вводять ізотонічний розчин натрію хлориду. Пальцями, якими фіксують лімфатичний вузол, роблять масаж вузла, після чого, повільно висуваючи голку з нього, насмоктують в шприц лімфу, яку поміщають на предметне скло і накривають покривним склом. Правильність проведеної маніпуляції підтверджується наявністю в препараті великої кількості лімфоцитів.
Блідатрепонема — збудник сифілісу, в темному полі зору має вигляд ніжної тонкої слабо блискучою спіралі. Треба відзначити, що вона частіше представляється у вигляді тонкого і ніжного пунктиру. Це пов'язано з тим, що опуклі сторони завитків трепонеми краще висвітлюються. Характерний сріблястий відтінок блідої трепонеми, який обумовлений слабким заломленням світла. Добре помітні руху збудника сифілісу, причому частіше це поступальні або згинальні руху.
Дослідження неокрашенного (нативного) препарату в темному полі є найкращим і загальноприйнятим методом дослідження на бліду трепонем при сифілісі. Методи забарвлення блідої трепонеми в даний час практично не застосовуються.