Методика ПЛР — популярна діагностика вірусів і бактерій, яка в основі свого дослідження бере принципи і наукову базу молекулярної біології.

Ця методика не раз довела свою ефективність і надчутливість до різних видів збудників тому багато лікарів часто призначають пацієнтам такі аналізи.

ПЛР дослідження: що це таке? У чому переваги і недоліки?

ПЛР зараз повсюдно використовують в медичних клініках для точного діагностування вірусів і бактерій. Точне розшифровка назви ПЛР це полімеразна ланцюгова реакція , яка здатна виявляти навіть поодинокі бактерії і віруси, тобто в дуже малих концентраціях.

ПЛР досліджує лише ДНК вірусу і штучно збільшує його генетичну інформацію методом копіювання, використовуючи спеціальні реагенти, ферменти для кожного вірусу і інфекції. Виявлення чужорідних, невластивих ділянок ДНК проби вказує на наявність інфекції.

Таким чином, головна перевага аналізу — це його швидкість, універсальність і висока чутливість . Але, проте, нерідко пацієнти скаржаться, що результати ПЛР-дослідження виходять хибнопозитивними або помилково негативні , що підриває довіру людей до цього аналізу.

Однак, справа не в самій методиці, яка визнана точної і ефективною, а в ряді людських і професійних факторів, серед яких потрібно виділити:

• Ігнорування пацієнтом вимог лікаря або правил підготовки до дослідженню;
• Непрофесіоналізм лікаря;
• Недостатня кваліфікація медичного працівника (медсестра);
• Дешеві реагенти лабораторії;
• Недотримання стандартів тест-систем лабораторіями.

Перед здачею аналізу пацієнтом повинні бути дотримані певні вимоги, щоб не отримати помилково негативні результати . До того ж нерідко непрофесійні лікарі або недостатньо кваліфіковані працівники беруть біоматеріал не з тієї ділянки слизової або шкіри, що призводить до грубих помилок дослідження. А дешеві або неякісні реагенти — це проблема будь-якого аналізу, що призводить до спотворення результатів.

Віруси здатні до мутацій, а людський імунітет не встигає реагувати на зміни. Наочно це можна представити по вірусу грипу , тому нерідко пацієнти стикаються з протилежними результатами, зробленими в різних лабораторіях. Це відбувається тільки через недотримання стандартів використовуваних тест-систем при проведенні аналізу, які повинні реагувати на мутацію.

Діагностика методом ПЛР: що виявляє і діагностує

Як правило , дане дослідження асоціюється з діагностикою інфекцій урогенітального тракту, але можливості ПЛР дозволяють виявляти куди більш широкий спектр захворювань. У лабораторії можуть взяти аналіз крові, спинномозковій рідині, а також виділень з слизової зіва, носоглотки, вух, піхви, цервікального каналу, уретри і інших ділянок.

Таким методом можна досліджувати абсолютно будь-який придатний біоматеріал. У цьому його головна перевага на відміну від серологічних (виявлення антитіл) і культурологічних досліджень (посіви) . Найчастіше методику ПЛР використовують, щоб діагностувати статеві інфекції, такі як:

• Хламідії (хламідіоз);
• Тріхомонади (трихомоніаз);
• Гонококки (гонорея );
• Гарднерели (гарднерельоз);
• Уреаплазми (уреаплазмоз);
• Мікоплазми (мікоплазмоз)
• Гриби Candida (кандидоз);
• Цитомегаловирус;
• Вірус герпесу 1 і 2 типу (генітальний герпес);
• Вірус папіломи людини;
• Інші інфекції.

Методика ПЛР є « золотим стандартом » діагностики вище зазначених захворювань та інфекцій.

Крім того, в сироватці крові методом ПЛР можуть виявити віруси гепатиту всіх видів , Епштейн Барра, туберкульозу, герпесу всіх типів, ВІЛ, бактерію Helicobacter pylori, грип, токсоплазмоз та інші інфекції. У лабораторії здійснюють звичайний забір крові з вени, який везе на дослідження. ПЛР можна робити як якісним методом, так і кількісним . У другому випадку з точністю підраховується кількість вірусу або інфекції в пробі. Це називається в медицині « вірусне навантаження », яка дозволяє визначити ступінь вираженості інфікування і самого захворювання.

Прикладом кількісного дослідження ПЛР є так званий аналіз Фемофлор ​​. Завдяки йому визначають стан мікрофлори урогенітального тракту і наявність збудників статевих, анаеробних інфекцій, розраховують загальну бактеріальну масу і т.д. Далі лаборанти займаються їх кількісним підрахунком, складають графіки.

Даний аналіз використовують для широкої діагностики статевих, неспецифічних інфекцій і біоценозу урогенітального тракту. До того ж кількісними методами визначають віруси гепатиту, ВПЛ різних типів, мононуклеозу та інших захворювань. Наприклад, вірус гепатиту C не можна достовірно визначити інакше, ніж методикою ПЛР .

Як беруть аналіз?

Аналізи ПЦР беруться лікарем абсолютно безболісно, ​​не заподіюючи пацієнтам сильного дискомфорту. Біологічної пробою може стати будь-яка частина тіла. Забір крові здійснюють уколом з вени, а зіскрібки і мазки з слизових різних органів медичним шпателем. Однак, брати такі аналізи повинен тільки професіонал і бажано лікар, а не медсестра, так як нерідко це є справжньою причиною спотворення результатів.

Медичні працівники просто роблять зішкріб або мазок не ту біологічного матеріалу тому на такий, здавалося б, незначний нюанс слід звернути увагу. Вміст поміщають в штучне середовище для дослідження і везуть в лабораторію. Сам аналіз проводиться досить швидко і вже на наступний день пацієнт може забрати результати. Лабораторії, як правило, попереджають про всіх можливих затримках і порушеннях термінів, так як нерідко дослідження проби потрапляє на неробочий або святковий день.

Розшифровка результатів ПЛР

Розшифровка результатів не становить труднощів навіть для пересічного пацієнта, так як, це дійсно нескладно. Збудник або виявлений, або ні, якщо це якісне дослідження, яке передбачає ніяких числових показників. Трактування виявлених показників однакова що у чоловіків, що і у жінок . В результаті аналізів ПЛР так і вказується: виявлено (позитивно) або не виявлено (негативно) .

Якщо нічого не виявлено, то значить це норма і пацієнт здоровий або вийшов псевдонегативну результат, а особливо про це свідчить той факт, коли у людини яскраво виражена симптоматика. Найчастіше так відбувається з статевими інфекціями, так як дослідження вимагає серйозної підготовки. Перед аналізом не можна мочитися хоча б 2 години, займатися спринцеванием, а жінкам потрібно чекати закінчення менструації і не вставляти вагінальні свічки перед дослідженням.

Кров треба здавати натщесерце , а інші дослідження не вимагають спеціальної підготовки. В іншому випадку результати вийдуть помилковими, а лікар не зможе діагностувати захворювання і зрозуміти, як лікувати пацієнта.

Як правило, якщо виявлено збудник, то проводиться його чутливість до спектру антибактеріальних препаратів і це додатково відбивається в самих результатах аналізу. Однак, бувають і такі випадки, коли пацієнт пройшов курс лікування, і інфекція знову виявляється в аналізах ПЛР.

Насправді в цьому нічого дивного, так як мертві клітини вірусу якийсь час ще зберігаються тому перездавати аналіз потрібно через 2 тижні після лікування . Хибнопозитивні результати найчастіше вказують на помилки лаборантів. Розшифровка кількісного дослідження ПЛР вже трохи складніше. У такому випадку потрібно дивитися на референсні значення лабораторії і читати пояснення до показників.

В аналізах, як правило, вказані такі результати: «не виявлено», «менше порогового титру» «титр, що виходить за межі порогового значення »,« дуже високі титри ».У нормі нічого не повинно бути виявлено або на крайній випадок результат повинен бути менше порогового значення, що говорить про «стертою» клініці і вказує на перенесену в минулому інфекцію, а всі інші підвищені показники є патологією.

Трактування результатів ПЛР у жінок

Розшифровка результатів ПЛР, не пов'язаних з гінекологією і урології, є однаковою для обох статей , але в іншому випадку є своя специфіка. Виявлення у жінки статевої інфекції вказує на урогенітальне захворювання, яке може уразити уретру, органи малого тазу, сечовий міхур і нирки. Як наслідок, у жінки можуть спостерігатися супутні захворювання: пієлонефрит, цистит, уретрит, аднексит і т.д. Все залежить від клінічної симптоматики та результатів інших аналізів.

Ще однією небезпекою є виявлення інфекції під час вагітності жінки, так як існує великий ризик інфікування плода. Дитина може заразитися під час вагітності або проходячи через родові шляхи. Це загрожує йому серйозними наслідками і хворобами. Самі небезпечний період зараження в першому триместрі вагітності . Виявлення інфекції вимагає лікування, а в деяких випадках і переривання вагітності тому діагностику ПЛР краще робити до планування дитини .

Трактування результатів ПЛР у чоловіків

Виявлення статевої інфекції у чоловіків вказує на специфічний уретрит, простатит, викликаний збудниками . Аналіз ПЛР беруть зішкрібком із уретри, де зазвичай і осідають всі «інфекційні агенти». Вони також можуть потрапити в сусідні органи, викликаючи інші захворювання і неприємні стани. Наприклад, прихований перебіг хвороби хламідіозу може привести до виникнення так званого «strong> синдрому Рейтера , що вражає суглоби і імунну систему.

Виявлені інфекції вимагають лікування, так як для чоловіків теж вкрай небезпечні наслідки недоліковані хвороби. Метод ПЛР здатний виявити інфекцію, навіть якщо пацієнт не відчуває ніяких симптомів, але у чоловіків, як правило, симптоми відразу дають про себе знати. У такому випадку потрібно обов'язково звернутися до лікаря або самостійно прийти в приватну клініку. Тим більше, особливо важливо проходити ПЛР діагностику обом партнерам при плануванні вагітності.

Вартість аналізу

Аналізи ПЦР можна здати зараз в кожній приватній лабораторії. Все залежить від того, що пацієнтові збираються діагностувати. Якщо потрібно здати аналіз на статеві інфекції, то один показник коштує приблизно 300-400 рублів , але, як правило, в прейскуранті медичної організації передбачена можливість зробити комплексне дослідження, куди будуть включені відразу кілька видів показників статевих інфекцій.

Кількість таких збудників буде різним: 6, 11, 17 і т.д. Ціни, відповідно будуть варіюватися від 1300 до 6000 рублів . Якщо здавати кров методом ПЛР на виявлення різних інфекцій, то ціни будуть абсолютно різними: від 300 рублів до 17000 рублів . Один з найдорожчих аналізів ПЛР — це діагностика гепатиту С , так як даний аналіз вимагає проведення дуже багатьох додаткових тестів. Кількісні методи ПЛР, як правило, значно дорожче якісних .

Ціни на виділення з носа, зёва та інших органів будуть приблизно від 350 рублів до 5000 рублів. Пацієнт може ще і додатково сплатити послуги забору крові / мазка / зіскрібка, а їх вартість буде приблизно 150-350 рублів. Таким чином, цінова політика залежить від передбачуваного діагнозу, а сказати середню вартість аналізу ПЛР досить складно.

А тим більше без аналізів ПЛР не завжди можна точно встановити діагноз, так як інші дослідження в силу своєї специфіки не здатні виявити певних інфекційних агентів.

Аналізи ПЦР на сьогоднішній день практично замінюють інші методи лабораторної діагностики, які менш точні і специфічні. Швидкість дослідження дозволяє оперативно виявити захворювання. Але, тим не менше, їх вартість все ж чималенька, а державні поліклініки можуть зробити такі аналізи безкоштовно за рахунок поліса ОМС тільки по гострої необхідності , але не у випадку звичайної профілактики або підозр.