Бактеріологічне дослідження сечі направлено на визначення збудника викликав захворювання.
Отримання зразка сечі для бактеріологічного посіву
Потрібно чиста середня порція сечі. Важливо, щоб зразок був отриманий до початку лікування антибіотиками, так як вони швидко знижують кількість бактерій, що може привести до спотворення результату аналізу.
Якщо хворий вже приймає антибіотики, це необхідно вказати в напрямку.
Колись широко поширена практика взяття сечі для мікробіологічних досліджень шляхом катетеризації була залишена, так як було виявлено, що процес катетеризації сам по собі пов'язаний з ризиком інфікування.
Однак цей спосіб застосовується у пацієнтів з постійним катетером. Будь-які бактерії, присутні в сечі, будуть швидко розмножуватися, залишаючись в дренажної сумці катетера. Тому сечу не слід брати з дренажної сумки, це призведе до неправильної оцінки вмісту бактерій в сечовому міхурі. Сечу слід збирати з ізольованого рукава дренажної трубки, за допомогою шприца і голки, дотримуючись асептики.
Асептика важлива з таких причин :
| це знижує ризик інфікування пацієнта з катетером,
| це знижує ризик перехресного інфікування персоналу та інших пацієнтів,
| це знижує ризик забруднення зразка сечі бактеріями з навколишнього середовища.
Ємність для збору сечі
Сеча повинна бути зібрана в стерильний посуд. Повністю заповнювати ємність необов'язково. Досить 5-10 мл.
Транспортування в лабораторію
Сеча є хорошим середовищем для зростання бактерій. Будь-які бактерії, що знаходяться в сечі в момент її збору, будуть продовжувати розмножуватися в лабораторному посуді, що дасть хибнопозитивний результат. Тому важливо, щоб сеча була досліджена не пізніше, ніж через кілька годин після її збору. Час взяття зразка слід зазначити в напрямку.
Якщо відправка в лабораторію затримується, сечу слід зберігати в спеціальному холодильнику, так як низька температура уповільнює ріст бактерій. Створено спеціальний метод, який дозволяє провести посів сечі безпосередньо після її збору. Пластинку, покриту живильним середовищем, занурюють в зразок сечі, висушують і відправляють в лабораторію.
У лабораторії
Як будь-який зразок, призначений для мікробіологічного дослідження, сечу необхідно:
| оглянути макроскопически,
| досліджувати під мікроскопом,
| зробити посів на живильне середовище, щоб визначити присутність бактерій.
При виявленні патогенних бактерій провести визначення їх чутливості або стійкості до ряду антибіотиків.
Макроскопічний огляд. Нормальна сеча — прозора солом'яно-жовта або жовта рідина. Хоча на вигляд сечі неможливо поставити діагноз, наявність сечової інфекції можна припустити. Як і інші бактеріальні інфекції, інфекція сечових шляхів пов'язана з залученням для боротьби з бактеріями. Мертві і гинуть клітини, що виділяються з ділянки, ураженого інфекцією, в складі запального ексудату, називаються гноєм. Гній в сечі (піурія) робить сечу каламутній. Однак відсутність каламуті не гарантує відсутності інфекції, а каламутна сеча необов'язково означає інфікування, так як є і інші причини помутніння сечі. Інфікування деякими бактеріями може надавати сечі неприємний запах.
Мікроскопічне дослідження. Певний обсяг сечі досліджують під мікроскопом, головним чином для виявлення в ній лейкоцитів і . У нормі сеча містить трохи лейкоцитів і еритроцитів, але значне збільшення кількості лейкоцитів є підтвердженням інфекційного процесу. Однак велика кількість лейкоцитів може бути в сечі і при відсутності бактерій. І навпаки, у деяких пацієнтів з інфекцією сечових шляхів немає великої кількості лейкоцитів в сечі.
Інфекція іноді пов'язана зі збільшенням кількості еритроцитів (гематурія), але існують і інші причини збільшення кількості еритроцитів (здебільшого, захворювання нирок). У сечі можуть бути видні епітеліальні клітини, злущуються з поверхні нижніх відділів сечовивідних шляхів. Епітеліальні клітини, злущуються з поверхні жіночих статевих шляхів, іноді виявляються в сечі, не мають патологічного значення і швидше свідчать про те, що сеча була зібрана неправильно і тому може містити бактерії з жіночого статевого тракту. Якщо бактерії присутні в сечі у великій кількості, вони можуть бути видні при мікроскопічному дослідженні.
Посів. Гарантоване підтвердження наявності або відсутності бактерій і їх ідентифікація можливі тільки в культурі сечі. Культура в даному контексті означає сукупність життєздатних бактерій, отриманих із сечі. Певний обсяг сечі поміщають на щільну культуральну середу в чашку Петрі. Культуральная середовище містить всі компоненти, необхідні для росту бактерій. Потім чашку Петрі закривають і поміщають в термостат при температурі + 37 ° С (оптимальна температура для росту бактерій) і залишають на 24 години. Зростання будь-яких бактерій проявляється у вигляді утворення колоній на поверхні щільного середовища. Кожна колонія містить тисячі бактерій, що відбулися від єдиної клітини, що знаходилася в сечі. Число колоній прямо відображає число мікробних клітин в зразку. Якщо сеча була стерильна, колоній може не бути (живильне середовище залишається незмінною).
Як було сказано раніше, сеча в нормі може містити невелику кількість бактерій, що походять з нижньої третини уретри, так що тільки присутності бактерій (бактериурии) недостатньо для діагнозу інфекції сечовивідних шляхів.
Термін «значна бактеріурія» вперше застосували в 1956 р Касс (Kass) і Фінленд (Finland) для діагностики інфекції сечового тракту. Вони визначили, що з деякими застереженнями кількість бактерій, що перевищує 10 5 (100 000) в 1 мл сечі, дозволяє поставити діагноз інфекції сечового тракту. Хоча пізніше було показано, що симптоми інфекції сечових шляхів можуть з'являтися при кількості бактерій менше 10 3 / мл і що у деяких пацієнтів симптоми відсутні при кількості бактерій більше 10 5 / мл, показник Каса досі широко застосовується, і кількість бактерій більше 10 5 / мл залишається критерієм для діагностики інфекції сечових шляхів. Підраховуючи кількість колоній, що виросли при посіві відомого об'єму сечі, можна визначити початкову концентрацію бактерій в зразку сечі.
Кожна колонія — результат ділення єдиної клітини, так що колонії є чистими (містять тільки один вид бактерій). Макроскопічний вид колоній специфічний для кожного виду бактерій, але для їх повної ідентифікації необхідні подальші дослідження.
Хоча відомо, що інфекцію сечових шляхів викликає кілька типів бактерій, найбільш часто збудником є Е. coli . Випадки змішаної інфекції зустрічаються рідко, за винятком пацієнтів з постійним катетером. Тому виявлення багатьох видів бактерій, з яких жоден не домінує, означає швидше за все, що сеча була забруднена бактеріями з нижньої третини уретри або з аногенітальний області. Іншими словами, зразок був неправильно зібраний. Чисте зростання (зростання одного виду бактерій) з кількістю бактерій більше 10 5 / мл сечі дозволяє поставити діагноз інфекції сечових шляхів.
Чутливість. Результати цього аналізу повідомляють про те, які антибіотики слід призначити в разі конкретної бактеріальної інфекції. Зрозуміло, цей тест не проводять, якщо результати посіву сечі були негативні або виявлено незначну кількість бактерій. Метою цього аналізу є визначення чутливості або стійкості мікроорганізму, що викликав інфекцію, до ряду антибіотиків. Бактерії стійкі до антибіотика, якщо він не викликає їх загибелі в культурі. При призначенні пацієнтові такий антибіотик буде неефективним. І навпаки, бактерії, чутливі до даного антибіотика, загинуть в організмі хворого при його призначенні.
Цей тест проводять, пересіваючи колонії бактерій на культуральні середовища, що містять ряд антибіотиків. Після інкубації середовища оглядають. Якщо бактерії стійкі до перевіряється антибіотика, зростання колоній зберігається і культуральне середовище виглядає так, як ніби антибіотик в неї не було додано. Якщо бактерії чутливі до перевіряється антибіотика, тоді зростання бактеріальних колоній відсутній, а культуральне середовище виглядає так, як ніби в неї не додавали мікроорганізми.
Так як тест на чутливість вимагає додаткового часу вирощування бактеріальних колоній, існує неминуча відстрочка (до 24 годин) видачі висновку. Якщо є підтвердження інфекції сечових шляхів, отримане при мікроскопії, тобто є велика кількість лейкоцитів і бактерій, деякі лабораторії проводять тест на чутливість до антибіотиків в зразку сечі, не чекаючи зростання бактерій в культурі.
Розшифровка результатів бактеріологічного посіву сечі
| Чистий зростання бактерій при їх кількості, що перевищує 10 5 / мл, вказує на інфекцію сечових шляхів. Збільшення кількості лейкоцитів (більше 10 в мм 3 ) дозволяє припустити наявність інфекції.
| Чистий зростання і кількість бактерій від 10 3 до 10 5 в 1 мл сечі вказує на те, що не можна ні підтвердити, ні відкинути діагноз «інфекція сечових шляхів». Підвищена кількість лейкоцитів (більше 10 в 1 мм 3 сечі) підтверджує наявність інфекції сечових шляхів. Чим вище кількість лейкоцитів, тим імовірніше наявність інфекції.
| Змішаний зростання бактерій вказує на можливе забруднення, особливо при наявності епітеліальних клітин. Однак змішаний зростання може маскувати інфекцію сечового тракту, викликану одним видом бактерій, що знаходяться в змішаній культурі, особливо якщо кількість бактерій більше 10 5 в 1 мл сечі. Ретельно зібраний повторний зразок може прояснити ситуацію. Нормальна кількість лейкоцитів вказує на те, що інфекція, швидше за все, відсутній, тоді як велика кількість лейкоцитів свідчить на користь її наявності.
| Стерильна сеча або концентрація бактерій менш 10 3 / мл вказує на відсутність інфекції. Кількість лейкоцитів менше 10 в 1 мл сечі (при мікроскопії) також вказує на відсутність інфекції.