Звичайні алергічні тести в умовах лабораторії полягають в дослідженні крові або інших рідин організму (наприклад, назального секрету) з метою оцінки імунологічної реактивності. Лабораторні тести на алергію можуть використовуватися для скринінгу алергії і виявлення потенційних алергенів.
У деяких випадках аналізи застосовуються на додаток до шкірних тестів уколом або ж замінюють їх, особливо якщо є такі протипоказання до проведення останніх:
- пацієнт — маленька дитина
- у пацієнта велике шкірне захворювання і не може бути вибраний вільну ділянку шкіри для тестування
- у пацієнта існує ризик розвитку анафілаксії при проведенні шкірних проб
- рідко зустрічається алерген, стандартний розчинякого в даний момент недоступний
- пацієнтові не можна припиняти поточну антигистаминную терапію.
Проведення аналізів на алергію
Імуноглобулін Е ( IgE )
Для вимірювання кількості , що виділяється у відповідь на вплив специфічного антигену, існує кілька методів:
- простий метод напівкількісного аналізу, такий як тест-смужки або метод іммунодота, при якому алерген точково наносять на нітроцелюлозні смужки
- складніші процедури,такі як радіоаллергосорбентний тест (RAST) або твердофазного імуноферментного тест (ІФА, ELISA).
В основі всіх цих тестів лежить один і той же принцип. Тестований антиген фіксується на носії (тест-смужка або диск для алергічних проб). Тестовані сполуки инкубируются разом з сироваткою пацієнта, яка може містити антитіла до алергену, що призведе до утворення комплексу антиген-антитіло. Ці комплекси метятся анти-IgE антитілами, після чого їх можна ідентифікувати за допомогою хромогенного речовини або радіоактивних міток шляхом вимірювання на сцинтиляційному лічильнику.
Загальний імуноглобулін Е
Вимірювання імуноглобуліну Е (IgE) допомагає лише зорієнтуватися в ситуації, коли йде пошук передбачуваного алергену. У нормі вміст IgE в сироватці крові 17-240 нг / мл (2,4 нг / мл = 1 МО / мл). Якщо кількість імуноглобуліну Е IgE перевищує 170 нг / мл (70 МО / мл), можна підозрювати наявність алергії, однак у багатьох здорових людей цей показник набагато вищий, і вони не мають на алергії, ні атопії.
У деяких пацієнтів, які зазвичай страждають алергічним або атопічний захворюванням, цей рівень перевищує 10 000 МО / мл. Підвищений рівень IgE виявляють також при:
- ,
- ,
- вродженому імунодефіциті,
- імуносупресії — пригніченні імунітету,
- реакції відторгнення трансплантата,
- при важких опіках.
Зазвичай рівень IgE вимірюють за допомогою методу ELISА (ІФА).
Мультитест
При скринінгу алергенів найбільш зручні системи, в яких різні алергени пов'язані з одним носієм. З цією метою використовуються як диски, так і розчини, що містять алергени. Даний тест дуже економічний і зручний.
Якщо в лабораторних тестах на алергію не виявлено вираженої сенсибілізації, необхідно використовувати інші, більш прямі методи ( уколом, визначення ).
Тест-смужки містять менше антигенів і менш точні.
Специфічний імуноглобулін Е
Кількісне визначення специфічного імуноглобуліну Е (IgE, один з видів ), спрямованого проти певного антигену, проводять за допомогою RAST або інших подібних тестів. При цьому можна перевірити до 500 алергенів.
Для кожної проби необхідно 50 мкл сироватки або секрету. Для контролю точності аналізу і сили відповіді використовують стандартну сироватку пацієнтів з алергією. Змісту IgE відносять до одного з класів по 4-6-бальній, але між концентрацією IgE і ступенем прояву клінічних симптомів немає прямої залежності.
Еозинофільний катіонний білок (ЕСР)
Катіонний білок еозинофілів (ЕСР) вивільняється з активованих еозинофілів в результаті їх руйнування в ході алергічної реакції, він володіє цитотоксическим і нейротоксическим дією. У нормі, вільний ЕСР можна виявити в крові.
Кількість ЕСР відображає ступінь активації еозинофілів, однак його рівень визначають в крові, що згорнулася, в якій еозинофіли піддаються руйнуванню. У нормі кількість ЕСР має бути менше 105 нг / мл.
При деяких захворюваннях в крові та інших рідинах організму визначається підвищений вміст ЕСР:
- реакції гіперчутливості негайного типу
- паразитарні інфекції
- неаллергический риніт з еозинофільним синдромом (NARES)
- назальні поліпи.
Рівень ЕСР — дуже варіабельний показник і не завжди підвищений при алергічних ринітах. При антиалергійною терапії, наприклад при прийомі кортикостероїдів, зазвичай спостерігається тенденція до зниження рівня ЕСР, що дозволяє простежувати перебіг хвороби.
триптази вивільняється із стовбурових клітин в процесі реакцій типу I — негайні реакції, наприклад , при анафілактичний шок. Вона більш стабільна, ніж гістамін, і легше ідентифікується.
Фізіологічні функції триптази не зовсім вивчені, але очікується, що вона, як і калікреїн, бере участь в синтезі брадикініну.
Тест дегрануляции баз офілов ( BDT )
Тест дегрануляции базофілів ( BDT ) також відомий як тест на вивільнення гістаміну.
з крові пацієнта виділяють базофіли і змішують їх в тест-пробірці з передбачуваним алергеном протягом 30 хвилин. Далі вимірюють вміст гістаміну. Як позитивного і негативного контролів аналогічну процедуру проводять з кров'ю пацієнтів-алергіків і здорових людей.
Базофіли пацієнтів з алергічним захворюванням досить чутливі і часто процес дегрануляції носить неспецифічний характер.
Тест стимуляції клітин алергеном ( CAST ) аналогічний тесту BDT, але в цьому випадку вимірюють кількість лейкотрієнів (D4, C4 і Е4), вивільнених з лейкоцитів . Так, як ці продукти синтезуються заново після впливу специфічного алергену, то неспецифічна стимуляція навряд пі надасть дію на результати тесту.
CAST є більш точним тестом в порівнянні з вимірюванням специфічного імуноглобуліну Е (IgE) і застосовується тільки для ідентифікації реакцій типу I — негайних реакцій.
іммунодіффузія (метод Ухтерлоні) використовується для виявлення таких антитіл, як антитіла проти сироватки гопубя (легкі любителя птахів) і антитіла проти Aspergillus ( легеневий аспергільоз).
Тестована сироватка наноситься в лунку в центр чашки з агаром, а антигени в різних концентраціях поміщають в лунки навколо. Антигени і антитіла починають дифундувати через гель у напрямку один до одного.
У разі присутності в тестованої сироватці специфічних антитіл, починають формуватися комплекси антиген-антитіло, створюючи лінію преципітації.
перехресний іммуноелектрофорез ( CIE ) і перехресний радіо іммуноелектрофорез ( CRIE )
CIE (перехресний іммуноелектрофорез) і CRIE (перехресний радіоіммуноелектрофорез) застосовують для ідентифікації та стандартизації екстрактівалергенів, які використовуються для шкірної проби уколом, провокаційних тестів і гипосенсибилизации. CIE використовується для визначення різновидів антигену, a CRIE — для визначення антигену.
Обидва тести можуть використовуватися для моніторингу гипосенсибилизации.