Діагноз хламідіозу можна достовірно встановити застосовуючи лабораторні методи дослідження, оскільки скарги і симптоми захворювання неспецифічні, а виявлене запалення статевих органів у жінки або кон'юнктивіт у новонародженого можуть бути викликані безліччю мікроогранізмов.
Для постановки діагнозу хламідіозу у вагітної жінки або новонародженого при вродженому хламидиозе досліджують різний матеріал, отриманий з кількох локусів:
— зішкріб епітелію — уретра, цервікальний канал, кон'юнктива нижнього або верхнього століття, задня стінка глотки, вульва,
— матеріали біопсії — ендометрій, фаллопієві труби, яєчники, спайки, внутрішні органи, перинатально загиблі плоди і діти,
— перша порція вільно випущеної сечі,
— венозна кров.
Діагностика вродженого хламідіозу проводиться за окремими алгоритмами.
Методи лабораторної діагностики хламідійної інфекції:
1. цитологічний,
2. культуральний,
3. молекулярно-біологічний (ПЦР),
4. імуноферментний аналіз,
5. серологічні тести — визначення антитіл до хламідій,
6. шкірно-алергічний тест,
7. фермент-специфічний метод.
А тепер більш докладно про особливості методів лабораторної діагностики хламідіозу.
Цитологічні методи діагностики хламідіозу
Цитологічні методи діагностики хламідіозу припускають виявлення мікроорганізму під мікроскопом . Матеріалом для дослідження є зішкріб з уретри і цервікального каналу, взятий тампоном, спеціальною щіточкою або ложечкою Фолькмана (безкровно).У мазках, пофарбованих за Романовським-Гімзою, знаходять внутрішньоклітинно розташовані включення синьо-фіолетового або фіолетово-рожевого кольору. Це і є тільця хламідій. Метод ефективний в разі гострої форми і малоинформативен при хронічному перебігу хламідіозу. Чутливість дослідження при хламидийном цервіциті становить 20-30%.
Метод культури клітин — «вирощування» хламідій на поживних середовищах. Культуральний метод діагностики хламідіозу є «золотим стандартом», тобто, якщо даний метод виявив зростання хламідій, то діагноз підтверджений на 100%.Метод вимагає дорогого устаткування, технічної підготовки, жорстких умов транспортування матеріалу. Особливості культуральної діагностики хламідіозу:
— матеріал для аналізу можна брати з різних місць, але їх кількість обмежена,
— матеріал потрібно транспортувати швидко в лабораторію,
— обробка проби складна ,
— час проведення аналізу — 12-72 години,
— метод рекомендований для контролю лікування хламідіозу
Молекулярно-біологічні методидіагностики хламідіозу
Молекулярно-біологічні методи діагностики хламідіозу засновані на аналізі послідовності нуклеотидів в ДНК або РНК. Види молекулярно-біологічних методів діагностики хламідіозу:
1. Метод ДНК-зондів:
• лігазная ланцюгова реакція,
• полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР).
2. Метод імунофлюоресценції:
• пряма модифікація.
• непряма модифікація.
Поява нового молекулярного діагностичного методу — полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) призвела до перевороту в діагностиці хламідіозу, дозволяючи виявляти цей мікроорганізм у хворого при наявності в пробі всього однієї хламідії. Така чутливість вимагає особливого контролю за якістю реагентів, дотриманням всіх тонкощів методики, де немає дрібниць, врахування можливостей методу, зокрема впливу інгібіторів, здатних заважати діагностиці інфекції навіть при явній клінічній картині захворювання.
Застосування полімеразної ланцюгової реакції при діагностиці хламідіозу:
— матеріал для аналізу можна брати з різних ділянок,
— основна роль в отриманні достовірного результату належить правильному забору матеріалу,
— транспортувати потрібно при низькій температурі,
— визначають наявність ДНК,
— час проведення аналізу 12-24 годин,
— використання в контролі лікування не потрібно.
Пряма імунофлуоресценції:
— можна обстежити різні ділянки (статеві органи, коньюнктиву),
— основна роль належить правильному забору матеріалу,
— якщо препарат фіксований — умови транспортування не мають значення,
— час проведення аналізу — близько 30 хвилин,
— результат залежить від досвіду лікаря,
— використання методу в контролі лікування обмежено.
Метод імуноферментного аналізу в діагностиці хламідіозу
Метод імуноферментного аналізу (ІФА) — для діагностики хламідіозу застосовують твердофазний ІФА на основі моноклональних антитіл. Результати аналізу можуть бути позитивними протягом 1,5-2 місяців після повного одужання.
— місця забору матеріалу обмежені через відсутності адресності реакції,
— визначальна роль належить забору матеріалу,
— умови транспортування матеріалу не мають значення,
— оцінка проб спрощена,
— прочитання тексту просте і об'єктивне,
— час проведення аналізу 3 години,
— в контролі лікування метод використовувати не можна.
Серологічні методи діагностики хламідійної інфекції:
• реакція зв'язування комплементу (РСК) ,
• реакція непрямої гемаглютинації (РНГА)
• реакція непрямої імунофлюоресценції (РНІФ)
• імуноферментний аналіз
Одноразове обстеження жінки і виявлення в сироватці крові IgG-антитіл в титрі 1:16 до 1:32 може свідчити як про свіжої хламідійної інфекції, так і проперенесений процесі. Необхідно повторити дослідження через 3-4 тижні. Якщо воно покаже зростання титрів імуноглобулінів G, то діагноз хламідіозу підтверджується.
Серологические тести є допоміжними, оскільки через низький імунної відповіді у 50% хворих хламідіозом антитіла не виявляють.
Серологічні методи діагностики хламідіозу широкого застосування не отримали, оскільки сам факт виявлення антитіл до хламідій не означає наявність у хворого збудника під час обстеження — можливо, хламідіоз був вилікуваний у минулому (читай Критерії лікування хламідіозу).
Шкірно-алергічний тест проводять введенням 0,1 мл диагностикума під шкіру у внутрішню поверхню передпліччя. Шкірно-алергічний тест до хламідій використовують як скринінговий метод для відбору хворих, підозрюваних в наявності урогенітального хламідіозу.
Фермент-специфічний метод. З метою виявлення збудника хламідіозу використовують експрес-тест « Chlamyden » безпосередньо на зразках, отриманих під час прийому.