Лабораторна діагностика цукрового діабету базується на дослідженні рівня глюкози і ряду спеціальних тестів таких, як:

— глікозильований гемоглобін (HbA1c),

— фруктозамін (Фра)

— постановки тестів толерантності до глюкози.

Визначення концентрації глюкози в крові , і ретроспективна оцінка ступеня глікемії взагалі , є основним критерієм діагностики.

Згідно з рекомендаціями робочої групи з діабету ВООЗ і Американської асоціації діабетології в 1998 р були прийняті нові параметри для характеристики груп ризику щодо захворювання на цукровий діабет.

Відповідно вмісту глюкози в капілярної крові , взятої натщесерце, нормальним вважається концентрація до 5,6 ммоль / л. Пацієнти, у яких рівень глюкози знаходиться в межах 5,6-6,0 ммоль / л відносять до групи IFG (Impaired Fasting Glucose — підвищена глікемія натще). Вважається, що в цій групі може бути найбільше число людей з порушеною толерантністю до глюкози, стадіями предіабету і прихованого діабету. При отриманні результатів, що перевищують 6,0 ммоль / л, робиться припущення, що пацієнт може бути хворий.

Для постановки діагнозу цукрового діабету дослідження глюкози має бути неодноразовим. Справа в тому, що на результати визначення глюкози впливають цілий ряд факторів.

Потрібно мати на увазі, що концентрація глюкози в крові відображає сіемінутное стан пацієнта і навіть у здорової людини коливання концентрації глюкози в крові натще в різні дні можуть досягати 0,8 ммоль / л. Це залежить від стану нервової системи, товщини проколюють шкіри, техніки забору крові. Відмінності стосуються навіть значень концентрації глюкози в капілярної і венозної крові у одного і того ж пацієнта. Тому дослідження в динаміці потрібно проводити тільки в капілярної крові або тільки в венозної крові для того, щоб результати були порівнянні.

Якщо по якійсь причині дотримуватися цього правила неможливо, то в результат дослідження вводиться поправочний коефіцієнт К:

глюкоза (венозна кров) = глюкоза (капілярна кров) * К,

де К = 1,12 (1,10-1,15).

Виходячи з клінічних спостережень і даних статистики, провідними фахівцями діабетології була сформульована «концепція ненадійності» результатів визначення глюкози із загальною невизначеністю на величину порядку 0,6 ммоль / л. Звідси ще раз стає зрозумілою необхідність неодноразових (повторних) досліджень глюкози для постановки діагнозу цукровий діабет і необхідність залучення додаткових маркерів цього захворювання, особливо, в групі пацієнтів IFG з вузьким межею кордонів коливань концентрації глюкози (5,6-6,0 ммоль / л) .

Такими додатковими маркерами є еритроцитарний глікозильований гемоглобін (в англомовній літературі більш правильним вважається термін « г лікірованний гемоглобін ») і сироватковий фруктозамін .

При наявності у пацієнта гіперглікемії, дані тести дозволяють ретроспективно оцінити ступінь вираженості цієї гіперглікемії:

— глікірованний гемоглобін HbA1c — за період 10-12 тижнів (час життя еритроцитарного гемоглобіну),

— фруктозамін, Фра — за період 2-3 тижні (час життя сироваткового білка альбуміну ).

Ці тести введені в сучасні алгоритми первинної діагностики захворювання, а також корисні в контролі лікування і визначення ступеня компенсації цукрового діабету.

HbA1c корисний для довготривалого контролю за перебігом цукрового діабету, а фруктозамін, як має більш короткий період життя, дозволяє лікарю швидше оцінити ефективність лікувальних заходів, дози препарату, підбір дієти.

При тривалому спостереженні за лікуванням діабетиків дослідження фруктозаміну призначається 1 раз в 2-3 тижні, гликированного гемоглобіну — 1 раз в 6-8 тижнів. Визначення концентрації глюкози — в міру необхідності.

При неможливості в лабораторії проведення досліджень гликированного гемоглобіну і фруктозаміну, хворим з групи IFG призначаються тести толерантності до глюкози.

Вагому додаткову інформацію в діагностиці цукрового діабету і, особливо , в можливості прогнозування його розвитку можуть мати такі тести:

— визначення інсуліну до і після навантаження глюкозою,

— визначення антитіл до інсуліну,

— С-пептиду ,

— проінсуліну,

— глюкагону ,

— панкреатичного пептиду,

— лептину ,

— мікроальбуміну ,

— антитіл до клітинострівців Лангерганса,

— декарбоксилази глутамінової кислоти і антитіл проти неї.

Кожен з вище перерахованих метаболітів доступний до дослідження за допомогою імуноферментного аналізу.

Визначення концентрації інсуліну застосовується для підтвердження діагнозу цукровий діабет у пацієнтів з групи IFG, для диференціації різних форм діабету, встановлення ступеня недостатності бета-клітин і підбору оптимальної терапії. Визначення інсуліну в крові проводять тільки у пацієнтів, які раніше не отримували препаратів інсуліну, так як до екзогенного гормону відбувається утворення антитіл.

Цукровий діабет I типу характеризується зниженням, а II типу — нормальним або підвищеним рівнем інсуліну. Підвищений рівень інсуліну під час голодування на тлі нормальної або підвищеної концентрації глюкози може бути показником інсулінорезистентності форм непереносимості глюкози і цукрового діабету, інших інсулінорезистентності станів. Для цих же станів характерно підвищення інсуліну і глюкози в відповідь на глюкозно навантаження.

Підвищений вміст інсуліну на тлі низьких концентрацій глюкози служить показником патологічної гіперінсулінемії, пов'язаної з пухлиною острівковогоапарату підшлункової залози.

Проінсулін

Проінсулін — е то білковий попередник інсуліну. Підвищення його концентрації в крові характерно особливо для цукрового діабету II типу, але може мати місце і при цукровому діабеті I типу. Підвищується також при вторинному діабеті, пов'язаному з вагітністю і ожирінням , при гиперинсулинизме на тлі інсуліноми.

С-пептид

С-пептид — це фрагмент молекули проінсуліну, в результаті відщеплення якого утворюється інсулін. Секретується в кров в кількостях еквівалентних інсуліну. С-пептид має ряд переваг для дослідження, ніж сам інсулін. На відміну від інсуліну, С-пептид не надходить в печінку і нирки, біологічно неактивний і тому в крові знаходиться більш тривалий час. Його період напіврозпаду близько 30 хвилин, а інсуліну — 5-10 хвилин.

Співвідношення в крові С-пептид / інсулін становить 5: 1. Звідси випливає, що рівень С-пептиду є більш стабільним індикатором секреції інсуліну, ніж власне інсулін. С-пептид дозволяє відрізнити ендогенний інсулін від інсуліну введеного парентерально, так як С-пептид не вступає в перехресну реакцію з антитілами до інсуліну. Крім того, лікувальні препарати інсуліну не містять С-пептид і його визначення в крові дозволяє оцінювати функцію бета-клітин підшлункової залози у хворих на цукровий діабет, які отримують інсулін.

Знижується рівень С-пептиду в крові при загостренні перебігу цукрового діабету , особливо I типу, що говорить про недостатність ендогенного інсуліну. Значно збільшується концентрація С-пептиду в крові при інсуліномі. Після хірургічного видалення інсуліноми, якщо виявляється підвищення С-пептиду в крові, то це вказує на метастази або рецидив пухлини.

Глюкагон

Підвищується рівень глюкагону в крові при недостатності інсуліну (цукровий діабет I типу). Значне збільшення глюкагону в крові характерно для пухлини альфа-клітин острівковогоапарату підшлункової залози — глюкагономах. Як наслідок цього завжди розвивається цукровий діабет. Знижується рівень глюкагону при панкреатиті , пухлинах або панкректоміі.

Панкреатический пептид

Є продуктом підшлункової залози. Метаболізм пептиду відбувається в печінці та нирках. Біологічну роль пептиду пов'язують з регуляцією екзокринної секреції підшлункової залози і жовчі. Концентрація пептиду в крові різко підвищується після прийому їжі і введення інсуліну.

При декомпенсованому цукровому діабеті рівень пептиду в крові підвищується, а при компенсації — нормалізується. Підвищений рівень панкреатичного пептиду в крові виявляється при доброякісних і злоякісних пухлинах підшлункової залози.

Лептин

Знову відкритий гормон білкової природи, який синтезується в жирових клітинах геном, що обумовлює огрядність. Має молекулярну масу 16 кД. Біологічна роль гормону всебічно досліджується, в даний час встановлена ​​його зв'язок з процесами регуляції ваги тіла. Рівень гормону в крові підвищується зі збільшенням огрядності людини, пропорційно ступеня ожиріння. Сироватковий рівень лептину має циркадний залежність. Доведено, що лептин має істотний інсулін-інгібуючої дії і є частиною механізму, що змінює обмін вуглеводів . Концентрація лептину вище у жінок, ніж у чоловіків.

Так як підвищений рівень лептину в крові викликає зниження секреції інсуліну і пропорційно пов'язане з цим збільшення рівня глюкози, то дослідження концентрації лептину може бути використано в якості діагностичного тесту, що характеризує один з ймовірних механізмів розвитку гіперглікемії.

Мікроальбумін

Характеризує ризик розвитку нефропатії і серцево-судинних ускладнень при діабеті I і II типів. Поява постійної мікроальбумінурії свідчить про можливий розвиток в найближчі 5-7 років вираженій стадії діабетичної нефропатії.

Прогнозування цукрового діабету

Встановлено три типи антитіл проти антигенних компонентів клітин острівців Лангерганса, які можуть нести прогностично значиму інформацію для виявлення осіб, які мають генетичну схильність до цукрового діабету I типу. Це антитіла до клітин острівців Лангерганса (ICA), антитіла до інсуліну та антитіла до декарбоксилази глутамінової кислоти (GAD) . Їх поява в крові пов'язано з розвитком — аутоімунних процесів, спрямованих проти острівцевих клітин. Встановлено, що у осіб з групи ризику, що мають антитіла до двох і більше антигенів, діабет розвивається протягом 7-14 років.

Гіпотиреоз — захворювання, що характеризується недостатньою продукцією гормонів щитовидної залози . Розрізняють первинний, вторинний і третинний гіпотиреоз , але тільки первинний характеризується ураженням самої щитовидної залози, тоді як в інших випадках причиною є захворювання гіпофіза або гіпоталамуса.

Первинний гіпотиреоз виникає внаслідок аномалії розвитку залози, ендемічного зоба , запальних захворювань, видалення залози, спадкових дефектів в синтезі тиреоїдних гормонів.

Загальний аналіз крові пригіпотиреозі виявляє гіпохромною анемію , відносний лимфоцитоз , еозинофілію , підвищена ШОЕ . Читайте про діагностику анемії в статті « Діагностика анемії. Які аналізи варто здавати? ».

Аналіз сечі — без специфічних змін.

Аналіз крові на гормони показує зниження рівня гормонів Т3 і Т4 ( трийодтиронина і тироксину), пов'язаного з білками і бутанолом екстрагується йоду.

Рівень тиреотропіну ( ТТГ ) варіює в залежності від типу гіпотиреозу : при первинному гіпотиреозі ТТГ підвищений, а при вторинному — знижений. Підвищення змісту ТТГ при гіпотиреозі — найбільш ранній і чутливий ознака первинного гіпотиреозу.

Біохімічний аналіз крові — зниження альбумінової фракції білків , підвищення холестерину , тригліцеридів , ліпопротеїдів дуже низької щільності і ліпопротеїдів низької щільності , глобулінів , активності лужноїфосфатази . При важкому гіпотиреозі підвищується активність ЛДГ , креатинкінази , АСТ .

Імунологічний аналіз крові пригіпотиреозі — знижується кількість і функція Т-лімфоцитів і зростає рівень імуноглобулінів .

Гипотиреоидная кома — найбільш важке ускладнення гіпотиреозу. Розвитку гіпотиреоїдний коми сприяють інфекції, травми, переохолодження, гіпоглікемія, гіпоксія і інші причини.

Діагностика гіпотиреоїдний коми грунтується на клінічних проявах і лабораторних даних. Відзначається — анемія, збільшення ШОЕ, олігурія , в крові виражений респіраторний ацидоз , різко знижується рівень трийодтироніну і тетрайодтиронина, тироксину, можлива гіпоглікемія. Часто виявляється зниження вмісту натрію , хлоридів , калію і підвищення рівня сечовини .

ТЗГ (TBG) пов'язує і транспортує найбільшу кількість Т4 і Т3 — тироксину і трийодтиронина . Представник глобулінів .

Застосування аналізу на тироксинзв'язуючого глобулін

• діагностика генетичного або ідіопатичного надлишку ТЗГ
• аналіз застосовують для розрізнення рецидивної і метастатической диференційованої карциноми щитовидної залози (особливо фолікулярного типу), якщо у пацієнтів підвищені рівні ТЗГ з- за карциноми
• для розрізнення підвищення / зниження концентрації загального трийодтироніну або загального тироксину череззмін в кількості ТЗГ
• з тією ж метою, що і тест на поглинання трийодтиронина смолою і визначення індексу вільного тироксину

Причини підвищення рівня ТЗГ

• б еременность
• ліки (наприклад, естрогени, протизаплідні засоби, перфеназин, клофібрат, героїн, метадон)
• естрогенпродуцірующіе пухлини
• системні захворювання (підвищується рано)
• гостра переміжнапорфірія
• гострий вірусний гепатит або хронічний активний гепатит
• лімфоцитарний безболісний підгострий тиреоїдит
• новонароджені
• спадкові випадки підвищення ТЗГ
• идиопатические випадки, коли причину зростання ТЗГ визначити неможливо

Підвищений тироксинзв'язуючого глобулін асоціюється з підвищеним сироватковим тироксином і зниженим пов'язаного зі смолою трийодтиронина.

Для зниженого тироксинзв'язуючого тироксину співвідношення зворотне.

Причини зниження рівня ТЗГ

• нефроз і інші випадки з вираженою гіпопротеїнемією: хвороби печінки, тривалі важкі захворювання, стрес (транстиретин також знижений)
• генетичний або ідіопатичний дефіцит
• акромегалія (транстиретин також знижений)
• важкий ацидоз
• ліки (наприклад, андрогени, анаболічні стероїди, глюкокортикоїди [транстиретин підвищений])
• тестостеронпродуцірующіе пухлини
• зниження зв'язування трийодтироніну і тироксину через прийом ліків: саліцилати, фенітоїн, оріназа, діабіназа, пеніцилін, гепарин, барбітал

Аналіз поглинання трийодтиронина смолою проводиться для вимірювання незайнятих тиреоїдними гормонами місць зв'язування на ТЗГ . Чи не застосовується для вимірювання концентрації сироваткового трийодтиронина при постановці діагнозу тиреотоксикозу .

Застосування аналізу на поглинання трийодтиронина смолою

• Аналіз поглинання трийодтиронина смолою проводиться тільки з одночасним вимірюванням вмісту сироваткового тироксину — Т4 для підрахунку індексу вільного тироксину , щоб виключити ймовірність того, що підвищення загального тироксину пов'язано з підвищенням тироксин зв'язує глобуліну , а не непостредственное патологією щитовидної залози і її гормонів
• Поглинання трийодтиронина смолою обернено пропорційно ненасиченим гормонсвязивающім ділянкам.
• Поглинання трийодтиронина смолою знижується при підвищенні вмісту зв'язуючого протеїну ( вагітність ).
• Поглинання трийодтиронина смолою підвищується при зниженні вмісту зв'язуючого протеїну ( гіпертиреоз ).
• При деяких важких нетіреоідних хворобах поглинання трийодтиронина смолою в повному обсязі компенсується і не повертає рівень тироксину в норму.

Показник: загальний тироксин х рівень поглинання трийодтиронина смолою пропорційний вільному тироксину і обернено пропорційний тиреотропного гормону .

Причини підвищення поглинання трийодтиронина смолою

• Вагітність .
• Ліки (наприклад, естрогени, протизаплідні засоби, перфеназин, клофібрат, героїн, метадон).
• Естрогенпродуцірующіе пухлини.
• Системні захворювання (підвищується рано ).
• Гостра переміжна порфірія .
• Гострий вірусний гепатит або хронічний активний гепатит .
• Лімфоцитарний безболісний підгострий тиреоїдит .
• Новонароджені.
• Спадкові випадки підвищення ТЗГ.
• Идиопатические випадки, коли причину зростання ТЗГ визначити неможливо.
• Підвищений тироксинзв'язуючого глобулін асоціюється з підвищеним сироватковим тироксином і зниженим пов'язаного зі смолою трийодтиронина.
• Для зниженого тироксинзв'язуючого тироксину співвідношення зворотне.

Причини зниження поглинання трийодтиронина смолою

• Нефроз і інші випадки з вираженою гіпопротеїнемією: хвороби печінки, тривалі важкі захворювання, стрес (транстиретин також знижений).
• Генетичний або ідіопатичний дефіцит.
• Акромегалія (транстиретин також знижений).
• Важкий ацидоз .
• Ліки (наприклад, андрогени, анаболічні стероїди, глюкокортикоїди [транстиретин підвищений]).
• Тестостеронпродуцірующіе пухлини.
• Зниження зв'язування трийодтироніну і тироксину через прийом ліків : саліцилати, фенітоїн, оріназа, діабіназа, пеніцилін, гепарин, барбітал.

Поглинання трийодтиронина смолою залишається в нормі:

• Вагітність на гіпертиреоз.
• нетоксичний зоб .
• Ліки, наприклад, препарати ртуті, йоду.

Гипертиреоз — це гіперметаболічний статус, що виникає внаслідок надмірної циркуляції тиреоїдних гормонів. У результатах аналізів підвищена кількість гормонів щитовидної залози .

Тиреотоксикоз — це сукупність симптомів обумовлена ​​посиленою продукцією гормонів щитовидною залозою.

Тиреотоксикоз з гіпертиреоз розвивається при активації синтезу і виділення гормонів щитовидною залозою. Тиреотоксикоз без гіпертиреозу з'являється внаслідок пошкодження клітини залози.

Не всі автори схильні поділяти поняття гіпертиреозу і тиреотоксикозу, сприймаючи дані поняття як синоніми.

Причини тиреотоксикозу на гіпертиреоз

• тіреостімулірующіх антитіла при дифузному токсичному зобі (хвороба Грейвса). Дане аутоімунне розлад, характеризується виробленням антитіл проти рецепторів ТТГ, постійно їх стимулюючи. Тиреостимулюючого антитіла відсутні у 5-20% пацієнтів.
• Автономні вузли в щитовидній залозі (сироватковий ТТГ низький): токсична аденома, токсичний мультіузловой зоб .
• Неонатальний тиреотоксикоз, асоційований з хворобою Грейвса у матері.
• ТРГ-гіпертиреоз (сироватковий ТТГ підвищений):

— з пухлиною гіпофіза,
— без пухлини гіпофіза.

• Секреція негіпофізарного ТТГ: трофобластичних тканини (новоутворення, секретуючі хоріонічний гонадотропін людини, який зв'язується з ТТГ- рецепторами), наприклад, хоріокарцінома, міхурово занесення, ембріональна карцинома яєчка.

Вільний тироксин (FT4) — не зв'язаний з білками тироксин — гормон щитовидної залози . У лабораторіях визначають загальний тироксин (той який пов'язаний і не пов'язаний з білками крові) і вільний.

Аналіз на вільний тироксин

• Аналіз на вільний тироксин дає скориговані значення у пацієнтів, рівень загального тироксину у яких змінюється внаслідок зміни рівня сироваткових протеїнів або ділянок зв'язування (наприклад, вагітність , ліки, в тому числі андрогени, естрогени, оральні контрацептиви, фенітоїн).
• Визначення вільного тироксину проводиться при моніторингу відновлення значень до норми — єдиний лабораторний критерій для оцінки адекватної замісної дози левотироксину , так як тільки через 6-8 тижнів дані зміни відіб'ються на ТТГ .

Причини підвищення рівня вільного тироксину

• Гипертиреоз .
• Гіпотиреоз , лікувався тироксином.
• Синдром еутіреоїдной слабкості .
• У рідкісних пацієнтів з міхурово занесенням або хориокарциноме з вираженим підвищеним рівнем лХГ спостерігається підвищення вільного тироксину, придушення тиреотропного гормону і притуплення відповіді тиреотропного гормону на стимуляцію тиреотропин-рилізинг гормоном. Повернення в норму вільного тироксину відбувається при ефективному лікуванні трофобластичної хвороби.
• Важка дегідратація — зневоднення (може бути більше 6,0 нг / дл).

причини зниження рівня вільного тироксину

• Гіпотиреоз .
• Гіпотиреоз , лікувався трийодтиронином .
• Синдром еутіреоідіческой слабкості.

Визначення концентрації глюкози в крові — одне з найбільш часто виконуваних біохімічних досліджень в лабораторіях.

глюкозооксидазного метод визначення глюкози в крові і сечі підстави на реакції окислення глюкози в присутності ферменту глюкозооксидази з утворенням перекису водню, яка в свою чергу в присутності пероксидази окисляє ОРТОТОЛИДИН з утворенням забарвлених продуктів, про концентрацію глюкози обіцяють за кількістю забарвлених продуктів.

Оскільки глюкозооксидазний метод спрямований на виявлення саме глюкози, а не всіх видів цукрів, його застосовують в диференціальної діагностики таких захворювань:

• пентозурія
• непереносимість лактози
• спадковий синдром непереносимості фруктози
• ізольована фруктозурия

Принцип глюкозооксидазного методу визначенняглюкози

Глюкоза в присутності ферменту глюкозооксидази окислюється киснем повітря з утворенням в ході реакції перекису водню. Перекис водню в присутності ферменту пероксидази окисляє ортотолуідін утворенням забарвленого з'єднання, інтенсивність забарвлення якого пропорційна вмісту глюкози. Даний метод дозволяє визначити рівень глюкози в плазмі крові, сироватці та спинномозкової рідини .

Нормальний вміст глюкози в крові, ммоль / л

— в плазмі, натщесерце

• новонароджені — 1,7 — 4,2
• діти від 6 тижнів до 15 років — 3,3 — 5,4
• дорослі (чоловіки, жінки) — 3,9 — 5,6

— в сироватці крові, натщесерце

• новонароджені — 2,6 — 4,2
• діти від 6 тижнів до 2 років — 3,3 — 5,4
• дорослі (чоловіки, жінки) — 3,9 — 5,6

Необхідні реактиви для визначення глюкози глюкозооксидазним методом

1. Натрію хлориду 9 г / л (ізотонічний розчин): готують, розчиняючи 0,9 г NaCl в 100 мл води.

2. Цинку сульфат, 50 г / л: 5 г сульфату цинку (ZnSO4) розчиняють у воді, об'єм доводять до 100 мл.

3. Натр їдкий, 0,3 моль / л: готують, розчиняючи 1,2 г NaOH в 100 мл води, концентрацію перевіряють титруванням (вона повинна бути 0,3 н).

4. Ортотолуідін, 1% -ний розчин: 1 г препарату розчиняють в 100 мл абсолютного спирту. Розчин можна зберігати в холодильнику в склянці з притертою пробкою кілька місяців. Наявний у продажу препарат можна очистити перекристаллизацией, для чого його розчиняють в абсолютному спирті, додають воду і випали кристали відсмоктують на фільтрі, потім сушать над хлоридом кальцію .

5. Ацетатний буферний розчин рН 4,8: ​​змішують 4 частини 0,25 н оцтової кислоти (перевірити титруванням) і 6 частин 0,25 н ацетату натрію (містить 34 г CH3COONa X ЗН2О в 1 літрі).

6. Глюкозооксидаза — сухий препарат активністю 3000 од / мг або більше.

7. Пероксидаза з хрону. 1 мг розчиняють в 5 мл ацетатного буфера, в холодильнику можна зберігати кілька днів.

8. Робочий реактив: в 80 мл ацетатного буфера розчиняють 2 мг глюкозооксидази і 1 мг пероксидази, додають 1 мл 1% -ного розчину ортотолуідіна, перемішують і доводять обсяг буферним розчином до 100 мл. Робочий реактив повинен бути прозорим, безбарвним або мати слабо-зелений відтінок, в цьому випадку він стійкий при зберіганні на холоді. Якщо ж забарвлення інтенсивна або через кілька годин після приготування починає випадати осад, це означає, що ортотолуідін недостатньо чистий і його треба перекристалізованої.

9. Калібрувальні розчини глюкози. Глюкозу попередньо висушують при температурі 37 ° С і зберігають в ексикаторі. Спочатку готують основний розчин з концентрацією 50 ммоль / л, для чого 180 мг речовини розчиняють в 20 мл насиченого розчину (приблизно 0,3% -ного) бензойної кислоти. З цього розчину готують робочі калібрувальні розчини, які містять 3, 6, 9, 12, 15, 18 і 21 ммоль / л, для чого беруть 0,6, 1,2, 1,8, 2,4, 3, 3,6 і 4,2 ​​мл основного розчину і доводять насиченим розчином бензойної кислоти до об'єму 10 мл. Ці розчини містять глюкозу в тих же концентраціях, у яких вона буває в крові, що полегшує розрахунки при калібрування.

Хід визначення глюкози глюкозооксидазним методом

У центрифужні пробірки вносять 1,1 мл розчину хлориду натрію, 0,4 мл розчину сульфату цинку і 0,4 мл 0,3 н розчину NaOH, перемішують, при цьому утворюється дуже тонкий гель гідрату окису цинку, в нього випускають 0,1 мл крові або каліброваного розчину, знову перемішують і через 10 хвилин центрифугують при швидкості 3000 об. / хв протягом 10 хвилин.

до 1 мл надосадової рідини додають 3 мл робочого реактиву і обережно перемішують.

Поступово починає розвиватися забарвлення, яка при звичайній кімнатній температурі досягає максимуму через 13-15 хвилин, а потім поступово зменшується. Фотометрують завжди через один і той же проміжок часу після додавання робочого реактиву в кюветах з довжиною оптичного шляху 1 сантиметр з червоним світлофільтром (довжина хвилі 625 нм) проти холостого досвіду, який ставлять одночасно з робочими пробами, але замість крові беруть фізіологічний розчин хлориду натрію.

При приготуванні каліброваного графіка замість проб крові беруть 0,1 мл відповідного калібрувального розчину.

Розрахунок рівня глюкози можна проводити за правилом пропорцій або по каліброване графіком, для побудови якого на одній осі відкладають концентрацію глюкози (ммоль / л), а на іншій — величину екстинкції.

Примітки до методика визначення глюкози глюкозооксидазним методом

1. Можна спочатку випустити кров з піпетки в ізотонічний розчин хлориду натрію , а потім додати розчини сульфату цинку і NaOH.

2. При систематичній роботі немає необхідності постійно будувати калібрувальний графік по всіх точках, достатньо щодня обробляти холосту пробу і 2-3 точки в діапазоні 3-9 ммоль / л, а повний калібрувальний графік будувати лише при зміні реактивів або налагодженні методики.

Феохромоцитома — рідкісний вид пухлин нейроендокринної системи з вкрай не специфічними симптомами — напади головного болю, пітливості, серцебиття, підвищення артеріального тиску. Своєчасна діагностика вкрай важлива — дозволяє уникнути фатальних наслідків і повністю вилікувати артеріальну гіпертензію.

Феохромоцитома — це

нейроендокринна пухлина, відбувається з хромафінних клітин мозкового шару кори наднирників, які здатні не тільки виробляти, але і метаболизировать гормони катехоламіни — адреналін та норадреналін .

парагангліоми — пухлини хромафінних клітин з симпатичної нервової системи черевної порожнини або парасимпатичної нервової системи. Розташовані переважно в області шиї і голови. Чи не виділяють гормони.

Остання класифікація пухлин Всесвітньої організації організації охорони здоров'я не містить термін « поза надпочечниковая феохрмоцітома ».

Епідеміологія феохромоцитоми

Феохромоцитома зустрічається дуже рідко, у 0,1-0,5% осіб з підвищеним артеріальним тиском і артеріальною гіпертензією . Найбільш часто у віці 40-50 років, але також її виявляють у дітей і осіб старшого віку. До недавнього часу в відношенні феохромоцитоми застосовувалося правило десяти відсотків :

• 10% поза наднирників — зараз 20-25% парагангліїв
• 10% злоякісні — сьогоднішні дані показують велику частоту
• 10% у дітей — переважно поза наднирників, значить — парагангліоми
• 10% сімейна форма — набагато частіше, в зв'язку з деякими генетичними синдромами, які стали доступні дослідженню зовсім недавно

Спадковість феохромоцитоми

Феохромоцитома є компонентом наступних генетичних синдромів:

• множинна ендокринна неоплазія тип 2 (МЕН II) — мутація RET-протоонкогена, практично в 100% випадків разом з медулярний рак щитовидної залози, який виявляють раніше
• синдром фон-Гіппеля -Ліндау — мутація VPL супрессорного гена — гемангіоми центральної нервової системи і очного нерва, новоутворення нирок і підшлункової залози
• синдроммножинного сімейного парагангліоматоза — мутація В-субьедініци мітохондріального ферменту сукцинатдегідрогенази (проявляється вненадпочечніковой феохромоцитомой з більшою ймовірністю злоякісності) або мутація D субодиниці даного ферменту з підвищеним ризиком множинних парагангліїв

Феохромоцитоми — єдиний прояв мутації сукцинатдегідрогенази, тому дану мутацію частіше виявляють в рамках генетичного обстеження пацієнта з спорадичною феохромоцитомой .

• нейрофіброматоз Реклінхаузена — нейрофіброми на шкірі, молочні плями, вузли на райдужці ока, бородавки в області пахв і паху, частота феохромоцитоми до 5%

Симптоми феохромоцитоми

Найбільш важке завдання в рамках діагностики феохромоцитоми — запідозрити її наявність у пацієнта, згадати про неї як ймовірну причинускарг.

Підвищена продукція катехоламінів проявляється раптовим початком і тріадою симптомів:

• головний біль
• підвищена пітливість
• посилене серцебиття

на тлі блідої шкіри і підвищеного тиску

але і ці симптоми не обов'язкові.

Іноді єдиний симптом феохромоцитоми — незначне підвищення артеріального тиску, яке може бути тимчасовим і слабким або у вигляді важких атак (гіпертензивний криз), а також постійним. Зрештою гіпертензія може також поєднуватися з ортостатичну гіпотензію (знижене артеріальний тиск в горизонтальному положенні тіла), що робить феохромоцитому унікальним захворюванням.

Метаболічні симптоми феохромоцитоми — порушення обміну глюкози , яке призводить до цукрового діабету (в т.ч. і на інсулінозалежний).

Високий худий гіпертонік з цукровим діабетом на інсуліні — завжди згадати про феохромоцитоме.

Для феохромоцитоми типово зниження ваги викликане гіперсекрецією катехоламінів ( метанефрину і норметанефріна ).

Реакція організму на надлишок катехоламінів завжди індивідуальна — від повної відсутності симптомів до кишкової псевдообстструкціі, гострого інфаркту міокарда (з нормальними результатами коронарографії), гострої серцевої недостатності або епілептичного нападу. У літературі описані близько 80 варіантів проявів феохромоцитоми.

В окремій категорії знаходяться пацієнти з інціденталомой наднирників — випадково виявленої пухлиною наднирника, серед них феохромоцитому діагностують у 4-5% (відносно часто!).

Скарги пацієнтів при феохромоцитомі

• головний біль 70-90%
• відчуття серцебиття і прискорене серцебиття 50-70%
• пітливість 60-70%
• знижений апетит 20%
• дратівливість 35-40%
• болю в області грудей або живота 20-50%
• нудота 30-50%
• підвищена стомлюваність 15-40%
• задишка 10-20%
• запаморочення 3-11%
• непереносимість тепла 13-15%
• парестезія рук і ніг 10%
• порушення зору 3-20%
• запор 10%
• пронос 5%

Прояви феохромоцитоми

• підвищений артеріальний тиск 98%
• хронічне 50-60%
• періодичне 50%
• ортостатичнагіпотензія 12%
• блідість шкіри 30-60%
• приливи жару 18%
• підвищена температура тіла 50-70%
• підвищений рівень глюкози в крові 40%
• блювота 30-45%
• судоми 3-5%

Діагностика феохромоцитоми

Біохімічна діагностика феохромоцитоми

• основа діагностики феохромоцитоми — підтвердження наявності метаболітів катехоламінів в крові або в сечі
• золотий стандарт діагностики феохромоцітми — підвищена концентрація метанефринів в крові
• також можна провести дослідження метанефринів в сечі і аналіз ваніліл-мигдальної кислоти в сечі
• дослідження вимагаютьретельної підготовки, від дотримання якої буде залежати правдивість результату
• клонідіновий супресивний тест проводять при граничних показниках метанефринів
• якщо Метанефрини в нормі, проводиться додатковий аналіз метаболітів допаміну — метоксітіраміна, що більш характерно для злоякісних видів феохромоцитоми
• дослідження хромогранина А в діагностиці феохромоцитоми не проводять у зв'язку з низькою специфічністю

Візуалізаціяфеохромоцитоми

• починається тільки після біохімічного підтвердження діагнозу
• в 98% випадків пухлина розташована в черевній порожнині або малому тазі, тому інструментальні методи націлені саме на дані області
• проводять КТ або МРТ
• МРТ краще у дітей, вагітних жінок і осіб з алергією на контрастне речовин
• УЗД органів черевної порожнини проводити не раціонально
• якщо обстеження не виявило пухлину, проводять МРТ органів грудної порожнини, шиї і голови

Лікування феохромоцитоми

Єдиний спосіб радикального лікування феохромоцитоми — операція . Для її проведення необхідна ретельна підготовка — попередньо 2 тижні приймати альфа-адреноблокатори (празозин, доксазозин, теразозин) з поступовим підвищенням дози з метою блокування дії циркулюючих в крові катехоламінів. Бета-блокатори адренорецепторів вводяться тільки після появи ефекту від альфа-блокаторів, особливо при частому серцебитті (супроводжує лікування альфа-блокаторами).

Ізольоване лікування бета-блокаторами може призвести до гипертензивному кризу.

Операція виконується переважно лапароскопически і більше труднощів викликає у анестезіолога, ніж у хірурга, оскільки при маніпуляціях з пухлиною дуже високий ризик раптового стрибка артеріального тиску і аритмії, а після видалення — раптової гіпотензії. Також присутній ризик гіпоглікемії — зниженого рівня глюкози в крові .

Після хірургічного лікування роблять контрольні лабораторні дослідження, а регулярні аналізи проводяться один раз в 1-2 року. Додатково, виходячи з результатів генетичних досліджень, шукають пухлини в інших органах — щитовидній залозі, нирках, підшлунковій залозі та ін.

Тиск після видалення феохромоцитоми може залишатися підвищеним ще деякий час, але поступово знижується.

Тест супрессии функції щитовидної залози трийодтиронином

Цей метод дослідження функції щитовидної залози традиційно використовувався в діагностиці розладів, пов'язаних з порушенням контролю продукції гормонів щитовидної залози , таких як, наприклад, хвороба Грейвса або гіперсекретірующая аденома щитовидної залози. В даний час використовується досить рідко, хоча його проведення могло б бути актуально у пацієнтів з підозрою порушення механізмів саморегуляції функції щитовидної залози.

Призначення трийодтиронина пригнічує поглинання радіоактивного йоду щитовидною залозою у понад 50% здорових осіб, але не у пацієнтів з хворобою Грейвса або токсичними вузлами, де є автономія секреції ТТГ — тиреотропного гормону .

Протипоказання

• Вагітність , лактація , дитячий вік.

Нецукровий діабет — захворювання, пов'язане з абсолютною або відносною недостатністю антидіуретичного гормону — вазопресину .

Абсолютний дефіцит вазопресину пов'язаний з порушенням його продукції гіпоталамусом (пухлини, туберкульоз та інші інфекції).

Відносний дефіцит вазопресину обумовлений нечутливістю рецепторів ниркових канальців до гормону (спадкова хвороба).

Загальний аналіз крові при нецукровому діабеті — зміни виявляються лише при вираженій дегідратації (підвищення рівня гемоглобіну , еритроцитів , лейкоцитів).

Аналіз сечі — відзначається різке збільшення добового об'єму сечі, зниження відносної щільності і осмолярності, глюкоза і ацетон у сечі відсутні. Зазвичай відносна щільність сечі становить 1,003 -1,005.

Вимірювання осмолярності сечі при нецукровому діабеті дозволяє виявити її причину (при власному нецукровому діабеті і нефротическом нецукровому діабеті осмолярність підвищується до 280 — 310 мосм / кг, при осмолярності нижче 55 — 280 моєму / кг припускають психогенную полідипсія, з цією ж метою проводять визначення осмолярності сечі).

Біохімічний аналіз крові — вміст глюкози в крові та тест на толерантність до глюкози в межах норми. При нефрогенном нецукровому діабеті відзначається підвищення в крові рівня натрію, хлоридів і реніну. Концентрація АДГ може бути в межах норми, в той час як при власному нецукровому діабеті і психогенної полідипсія вона знижена.

Лабораторні аналізи при нецукровому діабеті спрямовані на диференціальну діагностику гипофизарного нецукрового діабету і нефрогенного, а також інших захворювань, що супроводжуються поліурією (психогенна полідипсія, хронічна ниркова недостатність, хронічний пієлонефрит).

Для діагностики гипофизарного нецукрового діабету використовується проба з утриманням від прийому рідини протягом 8 год і вимірюванням осмолярності сечі і плазми, тест пригнічення шляхом водного навантаження та інші проби (проба з сечогінними, проба з внутрішньовенним введенням розчину хлористого натрію, пробу з сухоядением).