З'ясування можливостей і обмежень використання стовбурових клітин для клітинної терапії патології центральної нервової системи людини — одна з основних задач в дослідженні мультіпотентних стовбурових клітин мозку.

Трансплантація фетальних тканин і клітин використовується протягом більше 30 років в експериментальних дослідженнях і при лікуванні захворювань центральної нервової системи людини. Один із перспективних напрямів нейротрансплантації — внутрішньомозковий введення ембріональних стовбурових клітин, нервових стовбурових клітин і клітин-попередників. Пов'язано це з тим, що ранні ембріональні мультипотентні клітини мають більш високими потенціями інтеграції з мозком реципієнта, зберігаючи здатність до проліферації, міграції та термінальної диференціації.  Істотно також те, що є можливість клонування ембріональних стовбурових клітин, нервових стовбурових клітин, клітин-попередників, їх спрямованої генетичної модифікації і попередньої диференціації, що дозволяє створювати значні обсяги нативного і генноїнженерного клітинного матеріалу для експериментальної і клінічної нейротрансплантації.

Встановлено, що популяція нейтральні клітин-попередників, виділених з мозку ембріонів людини, збільшується при культивуванні в середовищі, що містить EGF, bFGF і LIF в 10 млн разів, не втрачаючи при цьому здатності до спрямованої міграції та диференціації в нервові і гліальні клітини при подальшої трансплантації в мозок дорослих щурів.

Терапевтичний ефект виявлено при внутрішньомозкової трансплантації ембріональних стовбурових клітин, нервових стовбурових клітин і клітин-попередників при різних формах експериментальної патології центральної нервової системи. Пов'язано це з унікальною здатністю спрямованої міграції клітин-попередників не тільки до місць термінальної диференціації, але і до патологічного вогнища. Наприклад, при створенні локального вогнища фотоіндукованого апоптозу нейронів кори мозку мишей мультипотентні клітини-попередники миші формують диференційовані нейрони переважно в місці нейрональної загибелі.

При гліома мозку щурів трансплантовані нейрональні стовбурові клітини мігрують до пухлини і локалізуються по її периферії. Цікаво, що спрямована міграція відбувається не тільки при імплантації стовбурових клітин в місці локалізації пухлини, а й при введенні цих клітин в віддалені від неї ділянки ипсилатеральной кори, і навіть в протилежну півкулю або в шлуночки мозку. Більш того, нервові стовбурні клітини були виявлені в місці локалізації пухлини після внутрішньовенного введення нейрональних стовбурових клітин.

Виходячи з цього, представляється можливим використовувати нервові стовбурні клітини в нейроонкології для цілеспрямованого транспорту протипухлинних препаратів, наприклад цітозіндезамінази.

Лікування дитячої онкології в Ізраїлі проводиться не тільки традиційними методами — хірургічним, хіміотерапією та іншими, а й із застосуванням клітей пуповинної крові, як аутогенних так і алогенних.

Внутрішньомозкова трансплантація щурам клітин-попередників, експрессірующіх інтерлейкін-4, призводить до поступового зникнення пухлини. Трансплантовані клітини-попередники, мічені BrdU, зберігаються протягом декількох тижнів.

Перспективним також є застосування клітинної терапії в лікуванні різних форм демієлінізуючих захворювань. У зв'язку з цим інтерес представляють результати трансплантаційної терапії генетично зумовленого дісміеліногенеза у мутантної лінії мишей shiverer, у яких порушена міелінообразующая функція олигодендроцитов. При внутрижелудочковой трансплантації новонародженим мишам цієї лінії клонованих стовбурових клітин відбувається заміщення дефектних олигодендроцитов на міелінобразующіе клітини олігогліі, які De novo формують мієлінові оболонки. Підтвердженням цього служить часткове або повне зникнення тремору, основного симптому ураження центральної нервової системи у мишей лінії shiverer.

Клоновані клітини-попередники олигодендроцитов трансплантували також в спинний мозок нормальних і новонароджених щурів. Використано клітини, що містять ген Lac Z і клітини, які експресують? -галактозідазу (LacZ +). У спинному мозку md щурів трансплантовані клітини мігрували по аксональним трактах на відстань 7 мм (Lac Z) і 12 мм (Lac Z +) від місця введення і утворювали нормальні мієлінові оболонки.

нейтральні клітини-попередники субвентрікулярной зони дорослих мишей мігрують до вогнища демієлінізації в мозолисте тілі, викликаної локальним введенням лізолецітіна, і трансформуються в олігодендроціти і астроцити. Ці клітини експресують ембріональні форми молекул клітинної адгезії нейтральні клітин, пов'язані з полісіаловой кислотою (PSA-NCAM).

PSA-NC AM-позитивні клітини складають понад 90 % Клітин нейросфер, отриманих з клітин мозку ембріона. У разі культивування нейросфер на адгезивному субстраті відростки нервових клітин формують зону росту, в якій зміцнюються PSA-NCAM — позитивні клітини, які експресують антигени, характерні для олігогліі.

нейросфер, збагачені PSA-NCAM-позитивними клітинами-попередниками олигодендроцитов, отримали назву «олігосфери». При трансплантації олігосфер в мозок новонародженим мишам лінії shiverer клітини-попередники дають початок клітинам, що формує мієлінові оболонки аксонів. Отже, олігосфери можуть бути матеріалом для трансплантації при демієлінізуючих захворюваннях центральної нервової системи.

тотипотентних ембріональні стовбурові клітини також можуть бути джерелами клітин-попередників астроцитів і олигодендроцитов. Клонування їх в середовищах, що містять комплекс ростових факторів (GFG2, EGF, PDGF), дає можливість отримати изоморфную популяцію клітин-попередників глії. При відсутності таких чинників в культуральному середовищі ці клітини диференціюються в астроцити і олігодендроціти.

Введення клітин-попередників глії, отриманих з ембріональних стовбурових клітин, в спинний мозок 7-денних щурів, у яких порушена миелинизация волокон, призводило до локального утворення мієлінових волокон. Міграція трансплантованих клітин обмежувалася 2 мм. При внутрижелудочковой трансплантації клітин-попередників глії 17-денним ембріонам щурів цієї лінії міелінізірованние волокна виявляли в різних областях головного мозку (мозолисте тіло, передня коміссуру, неокортекс, гіпокамп, тектум, таламус і гіпоталамус). Можливість трансепендімной міграції міелінобразующіх клітин вказує на розробку в перспективі клінічних методів внутрішньомозкової і внутрішньошлуночкової клітинної терапії спадкових демієлінізуючих захворювань в ранньому дитячому віці.

При гіпоксичної ішемії нейротрофічний ефект трансплантації ембріональних нервових клітин полягає в стимуляції процесів регенерації в центральній нервовій системі і зниженні кількості пошкоджених нейронів в корі головного мозку дорослих щурів.

фокальної ішемії мозку щурів викликали закриттям середньої мозкової артерії. Як трансплантатів використовували мультипотентні нейтральні стовбурові клітини, отримані з клонів ембріональних стовбурових клетокітератокарціноми людини, в тому числі клітини лінії NT2N. Імплантували в стриатум як нативні, так і кріоконсервовані клітини на тлі імуносупресивної терапії. Через 1 місяць після трансплантації значно покращилася рухова активність щурів в порівнянні з контрольними ложнооперірованнимі тваринами.

Встановлено, що більше половини трансплантованих стовбурних клітин кісткового мозку мігрують в півкуля мозку, де знаходиться ішемічний вогнище. Кількість астроцитів зростає в 1,5 рази в порівнянні з контрлатеральний півкулею. Передбачається, що трансплантація стовбурових клітин кісткового мозку може бути використана для лікування захворювань центральної нервової системи.

Досліджувалися морфологічні та поведінкові ефекти трансплантації нейтральні стовбурових клітин (лінії МНР36), виділених з гіпокампу 14-денних ембріонів. МЕ1Р36-клітини імплантували над пошкодженим полем СА1 гіпокампу. За даними гістологічних досліджень, трансплантовані клітини мігрували в зону пошкодження, відновлювали структуру поля СА1 і диференціювалися в зрілі нервові і гліальні клітини, що призводило до відновлення порушених когнітивних і поведінкових функцій. Аналогічні результати отримані при імплантації МНР36 в гіпокамп мавп-мармозеток після цитотоксичної пошкодження поля СА1 гіпокампу, а також у щурів після цитотоксичної пошкодження холінергіческіх структур переднього мозку. У всіх випадках трансплантація клітин МНР36 супроводжувалася відновленням структури і функцій пошкоджених утворень мозку.

У ряді досліджень проводили трансплантацію стовбурових клітин при експериментальній моделі хвороби Паркінсона. L. Studer et al. (1998) використовували клітини-попередники, виділені з вентрального відділу середнього мозку 12-денних ембріонів щурів. Вони культивували проліферуючі клітини в бессивороточной середовищі, що містить FGF2 протягом 1 тижня. В подальшому проводили роллерного культивування нейросфер і диференціацію клітин-попередників в дофамінергічних нейрони після видалення ростового фактора. Такий підхід дозволяв отримувати 30-кратне збільшення кількості клітин. Амфетамінового проби показали, що клітини нейросфер, трансплантовані в стриатум щурів, компенсували порушення локомоторной активності тварин, викликані одностороннім пошкодженням дофамінергічних нейронів чорної субстанції 6-гідроксідофаміном.

В умовах експериментальної моделі Паркінсона проводилася трансплантація плюрипотентних клітин тератокарціноми людини в чорну субстанцію і стриатум. Ці клітини активно проліферіровать, проте кількість нейронів, екснрессіруюгціх тирозингідроксилази було недостатнім для відновлення функції нігростріарной системи.

При експериментальному паркінсонізмі у щурів для внутрістріарной трансплантації використовували також мультипотентні генетично модифіковані стовбурові клітини кісткового мозку щурів і людини (трансдукція генів, що кодують тирозингідроксилази і гуанозінтріфосфатцргклогідролазу — фермент, необхідний для вироблення кофактора тирозингідроксилази). Генетично модифіковані клітини синтезували L-DOPA In vitro і при трансплантації в стриатум в значній мірі знижували рівень функціональних порушень за результатами амфетамінової проби.

Для лікування експериментального паркінсонізму щурів запропонована стимуляція проліферації, спрямованої міграції та диференціації «покояться» стовбурових клітин зрілого мозку. При односторонньому пошкодженні 6-гідроксідофаміном дофамінергічних нейронів чорної субстанції і вентральної сегментальной області вводили в іпсілатеральний стриатум трансформуючий фактор росту (TGFa) через вживлену канюлю за допомогою мікроінжектора.

За даними гістологічних досліджень, в субвентрікулярной зоні стриатума і тільки на стороні пошкодження активно проліферують стовбурові клітини і генеруються нейрональні клітини-попередники, які мігрують в область TGFa, де формують зрілі нейрони. Через 3-4 тижні після операції в поведінці тварин спостерігали значне поліпшення локомоторною функції за показниками апоморфіновой обертальної проби. Передбачається, що спостережуваний ефект пов'язаний саме з TGFa, так як у хворих паркінсонізмом незначно підвищується рівень ендогенного TGFa. Можливо, внутрішньомозкова інфузія TGFa знайде клінічне застосування в лікуванні паркінсонізму та інших форм патології центральної нервової системи.

Зроблено також спроби трансплантації клонованих нейтральні клітин-попередників людини щурам, у яких моделювали хорею Гентінтона. Велика частина трансплантованих клітин дифференцировалась і експресуватися нейральні антигени, в тому числі DARPP-32 — інгібітор фосфатази, що міститься в дофамінергічних нейронах. Спостерігався диференційований зростання аксонів цих нейронів в мозку реципієнта без вираженої специфічності формуються зв'язків.

Для трансплантації використовували також лінійні нейральні постмітотичні клітини тератокарціноми людини (NTera-2), які диференціювалися під дією ретиноєвої кислоти і були подібними за біохімічними показниками з нейронами стриатума. Клітини NTera-2 трансплантували в стриатум щурів при його односторонньому пошкодженні хіноліновий кислотою. Щурам контрольної групи вводили тканину ембріонального стриатума. При порівнянні встановлена ​​рівна ступінь відновлення порушених рухових функцій. Отримані результати свідчать про перспективність генноінженерних технологій в створенні клітин із заданими параметрами, необхідними для клітинно-трансплантаційної терапії захворювань центральної нервової системи.

Ряд експериментальних досліджень присвячений вивченню терапевтичного ефекту трансплантуються стовбурових клітин при травмі головного мозку. Так, нативні або кріоконсервовані клітини NTera-2 вводили в зону механічного пошкодження кори головного мозку щурів. Гістологічні дослідження, проведені через 2 і 4 тижні, показали високу виживаність трансплантованих клітин, а іммуноцітохіміческіе реакції із застосуванням антитіл МОС-1, специфічних щодо молекул клітинної адгезії нейронів людини, дозволили встановити формування відростків у трансплантованих клітин і їх вростання в тканину мозку реципієнта. Однак рухові функції не відновлювалися.

При пошкодженні спинного мозку в якості трансплантата використовували ембріональні стовбурові клітини лінії ROSA26, які попередньо зазнали короткочасного впливу ретиноєвої кислоти (клітини вводили в зону контузії спинного мозку через 9 днів після нанесення травми). Через 2-5 тижнів у галузі трансплантації і на відстані 8 мм від пошкодження знаходили диференційовані олігодендроціти (43%), астроцити (19%), нейрони (8%). У тварин цієї групи спостерігали часткове відновлення координації моторних функцій задніх кінцівок.

Таким чином, результати експериментальних досліджень показали, що стовбурові клітини здатні стимулювати регенерацію пошкоджених і заміщати загиблі нейрони при гострій патології і нейродегенеративних захворюваннях центральної нервової системи. Їх можна використовувати для генної терапії, застосовуючи клоновані стовбурових клітин, які експресують продукти, необхідні для поповнення втрачених внаслідок пошкодження або захворювання нейрогуморальних факторів. Так як стовбурові клітини можна генетично модифікувати, а також, з огляду на їх здатність до спрямованої міграції в осередку ураження, передбачається їх використання в якості засобу доставки біологічно активних речовин, що стимулюють регенеративні процеси в центральній нервовій системі.

Паралельно з експериментальними дослідженнями ведуться клінічні випробування щодо можливості застосування стовбурових клітин в лікуванні захворювань центральної нервової системи. Так, в 2000 р закінчилися перші клінічні випробування з перевірки безпеки пересадки нейробластов, отриманих зі стовбурових клітин тератокарціноми NIera-1 людини. Незрілі клітини розмножували багаторазовим пассажірованіем і отримували біомасу 50-100 млн клітин. У частині клітин досліджували фенотип і відсоток домішок, відсутність контамінації вірусами і бактеріями. Потім з живильного середовища прибирали LIF і фідерний шар клітин, створюючи умови для спрямованої диференціювання ембріональних стовбурових клітин в нейрони. Склад суміші, що індукує 95% -ю диференціювання ембріональних стовбурових клітин в нейрони, фірма «БіоЛейтон» (США) не розголошує. Культуру нейробластов пропускали через проточний сортер для видалення незрілих клітин тератокарціноми. Після повторної очистки та визначення фенотипу, ретельно підготовлені клітини (10-12 млн нейробластов) за допомогою спеціальної мікроканюлі і шприца вводили під контролем стереотаксіса і комп'ютерної томографії в базальное ядро ​​мозку хворому через 6 місяців після геморагічного інсульту. Скринінг (12 місяців) наслідків трансплантації клітин в зону інсульту показав відсутність побічних небажаних ефектів в 100 % Випадків. У половини хворих розвивалося достовірне поліпшення моторної симптоматики в період 6-12 місяців після трансплантації. Позитивний клінічний ефект супроводжувався паралельним поліпшенням кровопостачання зони інсульту після трансплантації клітин. Середній приріст поглинання 2-дезоксиглюкозу (міченої флуоресцентною міткою), визначений за допомогою позитронної емісійної томографії, становив 18%, а у деяких пацієнтів сягав 35-40%. В даний час клінічні випробування проводяться також в ряді неврологічних центрів США і Європи.

Трансплантацію фетальних експлантатов в substatia nigra для локального заміщення втрачених ДОФА-ергічних нейронів в мозку хворих паркінсонізмом, які страждають вираженими руховими розладами, стали використовувати ще з середини 80-х років XX ст. Попередні досліди на тваринах підтвердили необхідність спрямованої доставки в обмежену зону мозку дофаміну. Ніякої необхідності одночасного відновлення нейрональних електричних мережевих зв'язків між донорськими організаціями та реципієнтную нейронами не виставлялися в якості умов лікування. Спочатку на мишах була розроблена технологія напрацювання великої кількості ДОФА-нейронів для пересадки в путам і substatia nigra мишам з модельним паркінсонізмом. Близько половини нейронів виживали. Виявилося, що пересадка популяцій клітин-попередників, на відміну від диференційованих нейронів, дозволяє створювати паростки оновлених клітин. Клітини-попередники більш ефективно, стабільно і довгостроково доставляють дефіцитні молекули медіатора або продукт нормального алеля гена прямо в зону пошкодження.

З цієї ж причини перевагу надають технологіям вирощування мієлін-продукують олигодендроцитов з ембріональних стовбурових клітин, щоб створювати в зоні ушкодження паростки регенерації з усієї ієрархії необхідних для регенерації клітин. Спочатку розмножують ембріональні стовбурові клітини до певної кількості, достатнього для ефективної трансплантації. Потім отриману масу недиференційованих клітин направлено перетворюють в популяцію міелінпродуцірующіх попередників олигодендроцитов, які маркуються селективними антигенами. Популяції проолігодендроцітов краще використовувати для трансплантації в місце демиелинизации. Змішані популяції, що зберігають активно мігрують попередники, доцільно вводити в бічний шлуночок, так як клітини-попередники мають здатність мігрувати до вогнищ демієлінізації і механічної травми.

В експериментах на нокаут-мишах була обгрунтована концепція лікування шляхом спрямованої «хімерізаціі» хворого мозку паростками здорової нервової тканини, клітини яких інтенсивно мігрують в разі використання ранніх попередників. Зараз такий підхід широко використовується в експериментах і перших клінічних випробуваннях для корекції травми головного і спинного мозку, лікування сфірінгоміеліі, розсіяного склерозу, спадкових дефектів мозочка і іншої патології.

Внутрішньочерепний крововилив (може бути в речовина мозку, субарахноїдальний, субдуральний) — основна причина смерті при лейкозах . Найчастіше відбувається при утриманні лейкоцитів більше 100 х 109 / л (100 000 / мкл) і різкому підйомі їх рівня, особливо під час бластних кризів.

Кількість тромбоцитів часто знижений.

Зміна в лікворі, характерне для внутрішньочерепного крововиливу.

Інфільтрація мозкових оболонок лейкозних клітинами:

• в лікворі спостерігаються зміни у 5% хворих гострий лімфобластний лейкозом , тут найбільш характерні зміни при рецидиві,
• для виявлення залишкових клітин, коли вони не визначаються морфологічно, застосовують метод ПЛР,
• поразку до 30% менінгеальних оболонок при злоякісній лімфомі , частіше — при дифузному гістіоцитарні (з великих клітин), лимфобластном і імунобластні лейкозі, зустрічається в 1 / 3-1 / 2 випадків при лімфомі Беркітта і у 15-20%пацієнтів з неходжкинской лімфомою ,
• при хвороби Ходжкіна центральна нервова система втягується рідко,
• при хронічному лимфоцитарном лейкозі , високодиференційований лімфоцитарною лімфомою і плазмоклеточной лейкозі центральна нервова система уражається вкрай рідко.

В аналізі лікворі можуть виявлятися:

• підвищення тиску і змісту білка , зниження до менше 50% глюкози в крові,
• збільшення кількості клітин, не обумовлених як бластні внаслідок нестійкості, але можуть бути ідентифіковані цитохімічним, імуноферментним, імунофлуоресцентний методами і проточної цитометрії,
• злоякісні клітини присутні у 60-80% пацієнтів з залученням мозкових оболонок.

Може ускладнитися менінгітом , викликаним бактеріями, опортуністичними грибами і т. П.

Синдром Рейє (синдром Рея) — гостра невоспалительная енцефалопатія з жировим переродженням печінки, нирок, рідше — серця і підшлункової залози . Синдром Рейє зазвичай виникає у дітей, які перенесли грип , вітряну віспу або гостру респіраторну вірусну інфекцію , і пов'язана з прийомом аспірину.

Діагностичні критерії синдрому Рейє

• Ліквор без патологічних змін, за винятком значно підвищеного тиску відкриття.
• Рівні ACT , АЛТ або аміаку перевищують триразово і більше разів верхню межу норми в сироватці крові .
• Гістологічно визначається незапальне пайову жирове переродження печінки.

Кома — важке патологічний стан, який характеризується розвиваються пригніченням центральної нервової системи з глибокої втратою свідомості і втратою реакції на вплив ззовні. При комі відзначаються порушення роботи дихальної, серцево — судинної та ін. Систем.

Причини коми

1. Отрути, наркотичні та лікарські речовини, токсини:

• седативні засоби (особливо алкоголь та барбітурати),
• інгібітори ферментів (особливо саліцилати, важкі метали, органічні фосфати , ціаніди),
• інші (наприклад, паральдегіду, метиловий спирт, етиленгліколь).

2. Мозкові порушення:

• забій мозку , крововилив , інфаркт, епілептичний припадок або аневризма, ураження речовини мозку (наприклад, при пухлинах , гематоми, абсцессе , паразитарних ураженнях),
• субдуральна чи епідуральна гематома, закупорка венозного синуса , гідроцефалія,
• інфекція (наприклад, менінгіт , енцефаліт ),
• гіпоксія яку викликали:

зниження вмісту і парціального тиску кисню в крові(Наприклад, при захворюваннях легенів, на великих висотах), зниження вмісту кисню в крові при нормальному його напрузі (наприклад, при анемії , отруєнні чадним газом, метгемоглобінемії). Читайте про діагностику анемії в статті « Діагностика анемії. Які аналізи варто здавати? ».

3. Судинні порушення (наприклад, субарахноїдальний крововилив, гіпертензивна енцефалопатія, шок , гострий інфаркт міокарда , стеноз аорти, синдром Морганьї-Адамса-Стокса, тахікардія).

4. Метаболічні порушення:

• порушення кислотно-основного стану ( ацидоз , алкалоз ),
• порушення балансу електролітів (підвищення або зниження вмісту натрію , калію, кальцію, магнію ),
• порфірія,
• аминоацидурия ,
• уремія,
• печінкова енцефалопатія,
• інші (наприклад, лейкодистрофия , лізосомні хвороби, синдром Бесс — Корнцвейга).

5. Аліментарна недостатність , наприклад вітаміну В12 , тіаміну, ніацину, піридоксину.

6. Ендокринні порушення органів:

• підшлункова залоза (діабетична кома, гіпоглікемія),
• щитовидна залоза ( мікседема , тиреотоксикоз ),
• наднирники (хвороба Аддісона, синдром Кушинга, феохромоцитома ),
• пангипопитуитаризм,
• паращитовидні залози (гіпофункція або гіперфункція).

Психогенні стани, які можуть імітувати кому

1. Депресія, кататонія.
2. Симуляція.
3. Істерія, конверсійне порушення.

Олігофренія — стан загальної недорозвиненості психіки вродженою чи набутою етіології.

Лабораторні показники при олігофренії обумовлені основним захворюванням .

Причини олігофренії

1. Олігофренія при вродженої патології або придбаної до моменту пологів

• Інфекція (наприклад, сифіліс , краснуха , токсоплазмоз , цитомегаловірус ).
• Метаболічні порушення (наприклад, цукровий діабет, еклампсія, плацентарна недостатність).
• Хромосомні патології (наприклад, синдром Дауна , синдром Едвардса , синдром котячого крику, синдром Клінефельтера).
• Метаболічні порушення:

— обміну амінокислот, наприклад фенілкетонурія , запах «кленового сиропу» у сечі, гемоцістінурія, цістатіонінурія, гіперглікемія, аргініносукцінатурія, цітруллінемія , гістидинемія , гіперпролінемії , хвороба Оастхауза, хвороба Хартнапа , синдром Жозефа, сімейна іміногліцінурія ,
— обміну ліпідів, наприклад хвороба Баттена, хвороба Тея-Сакса , хвороба Неймана-Піка , абеталіпопротеінемія, хвороба Рефсума , метахроматическаялейкодистрофия ,
— обміну вуглеводів , наприклад галактоземія, мукополісахарідоз ,
— обміну пуринів, наприклад синдром Леша-Найхана , спадкова оротовая ацидурия,
— обміну мінералів, наприклад идиопатическая гіперкальціємія , псевдо- і псевдогіпопаратиреоїдизм,
— інші (наприклад, склероз туберози, атаксія-телангіектазія).

2. Олігофренія при придбаної під час пологів патології

• Інфекція (наприклад, сифіліс , краснуха , токсоплазмоз , ЦМВ , ВІЛ , вірус простого герпесу ).
• Ядерна жовтяниця.
• Передчасні пологи.
• Гіпоксія.
• Травма.

3 . Олігофренія при придбаної після пологів патології

• Отруєння (наприклад, міддю, миш'яком, чадним газом).
• Інфекція (наприклад, менінгіт , енцефаліт ).
• Поствакцинальний енцефаліт.
• Інсульт .
• Травма .

Нормальні показники аналізу ліквору:

1) загальний білок в аналізі ліквору складає 0,15-0,45 г / л, білок в лікворі з'являється внаслідок фільтрації крові , більшу його частину становлять альбуміни , частина білка має мозковий походження,

2) альбумін 0,1-0,2 г / л — основна фракція білка в лікворі. Практично будь-яке захворювання гематоенцефалічний бар'єр призводять до підвищення кількості альбуміну, співвідношення альбумін / глобулін ліквору визначають тиск в спинно-мозковій каналі,

3) норма глюкози в лікворі 3,6-5, 2 ммоль / літр, що становить 60% концентрації глюкози в крові , особливе діагностичне значення має зниження рівня глюкози в лікворі при туберкульозному менінгіті та бактеріальному менингитах,

4) лактат або молочна кислота в аналізі ліквору становить 1,1-1,6 ммоль / літр, підвищення кількості лактату говорить про гіпоксії головного мозку,

5) магній -1,0-1,5 ммоль / літр,

6) хлориди — 115-130 ммоль / літр,

7) лімфоцити — менше 3, лімфоцити в лікворі це єдині клітини які можуть в нього проникнути через свого маленького розміру в сплетеннях шлуночків головного мозку.,

8) лейкоцити — менше 8, в аналізі ліквору лейкоцити це сума лімфоцитів і моноцитів .

Інсульт — гостре порушення кровообігу в головному або, рідше, в спинному мозку. Прийнято виділяти ішемічний інсульт і геморагічний, тромботический і емболіческій інсульт.

Фактори ризику — артеріальна гіпертензія, миготлива аритмія, гіперліпідемія, атеросклероз судин головного мозку. Переважний вік — 40 і більше років.

Симптомів інсульту досить багато. Їх ділять на загальномозкові, вегетативні і осередкові. До загальномозкових ознаками інсульту відносяться :

• сонливість
• зміна-емоційно-вольової сфери людини
• відчуття оглушення
• сильний головний біль і запаморочення
• відчуття втрати в просторі і в часі

до вегетативним симптомів інсульту відносяться:

• рясне потовиділення
• прискорене серцебиття
• сухість у роті

Осередкові симптоми залежать від місця, де розташований осередок захворювання.

Аналізи при геморагічному інсульті

Геморагічний інсульт виникає в результаті крововиливу в головний мозок або під його оболонки.

в загальному аналізі крові — лейкоцитоз, зрушення в лейкоцитарній формулі вліво. Індекс Крепса (співвідношення числа нейтрофілів і лімфоцитів) дорівнює 4-6.

ШОЕ підвищена.

В аналізі сечі при геморагічному інсульті можлива гематурія (мікро-).

Біохімічні аналізи крові — відзначаються зміни білкових фракцій крові, підвищення рівня глюкози , холестерину, хлоридів (ознака інформативний особливо в перші 6 — 8 год). У зв'язку зі змінами коагуляційних властивостей крові необхідний контроль за показниками коагулограми. Через 2 — 4 дні відзначається поступове відновлення коагулограми.

Аналіз ліквору при геморагічному інсульті дуже інформативний аналіз, особливо при неможливості проведення комп'ютерної томографії.

Колір ліквору залежить від домішки крові (кількості еритроцитів ). У перший день інсульту ліквор має рожево-червоний колір, пізніше — кров'янистий або ксантохромний.

У 20-25% хворих еритроцити в лікворі відсутні. Для геморагічного інсульту характерна присутність крові у всіх порціях ліквору. Зазвичай кількість еритроцитів при геморагічному інсульті становить 0,7 · 10 ⁹ / л — 2,7 • 10 ¹² / л. Визначення кількості еритроцитів дозволяє розрахувати обсяг крові й уявити орієнтовно локалізацію вогнища крововиливу. При глибоко розташованих вогнищах еритроцити можуть не потрапити в спинномозкову рідину, що нерідко ускладнює діагностику форми інсульту.

У більшості випадків при геморагічному інсульті вміст білка в лікворі зростає до 1 , 5 г / л і вище.

Плеоцитоз (підвищений вміст клітин в спинномозковій рідині) становить, приблизно, 500 • 10 ⁶ / л.

Особливо велика домішка крові в лікворі при субарахн-їдальня крововиливах. Плеоцитоз (нейтрофільний) досягає 400-800 • 10 ⁹ / л. В лікворі через кілька годин з'являються макрофаги (характерно для субарахноїдального крововиливу).

Висока діагностичне і прогностичне значення при геморагічному інсульті має визначення С-реактивного білка, як показника обсягу некрозу.

Аналізи при ішемічному інсульті

Ішемічний інсульт пов'язаний з припиненням або значним зменшенням кровопостачання ділянки мозку.

Причини ішемічного інсульту — емболія і тромбоз. Ішемічний інсульт — найбільш часто зустрічається форма інсульту.

Зміни в лікворі при ішемічному інсульті виражені менш різко.

Зазвичай ліквор прозорий, безбарвний, цитоз в межах норми (рідко зростає до 50 • 10 ⁶ / л). Плеоцитоз переважно лімфоцитарною-нейтрофільний.

Вміст білка в нормі. Виявляється білково-клітинна або клітинно-білкова дисоціація.

Дослідження креатинкінази — метод вибору для діагностики захворювань поперечно мускулатури. Креатинкіназа специфичнее і чутливіші, ніж ACT і ЛДГ , проте АЛТ більше асоційована з запальної міопатією і в цьому випадку більш корисна.

креатин синтезується в печінці, після захоплення м'язовими клітинами перетворюється в креатин-фосфат для акумуляції енергії.

Креатинин утворюється шляхом гідролізу фосфату і при неферментативної дегідратації креатину, а також при вживанні в їжу м'яса. Кінцевий продукт обміну білків.

Підвищена креатинурія з підвищеним співвідношенням креатин: креатинін зустрічається при активному м'язовому захворюванні, неврологічних станах, інших розладах, супроводжуваних м'язовою атрофією (наприклад, хвороба Аддісона, гіпертиреоїдизм, чоловічий синдром).

Підвищення рівня сироваткових ферментів при м'язових захворюваннях

• Поліміозит .
• М'язова дистрофія.
• Міотонічна дистрофія.
• Деякі метаболічні розлади.
• Злоякісна гіпертермія.
• Тривалі фізичні навантаження, пік сироваткових ферментів в крові спостерігається через 24 години після високих навантажень (наприклад, марафонський біг), в меншій мірі збільшується у добре підготовлених спортсменів.
• Пухлини Вільмса з рабдоміоматознимі проявами (може спостерігатися підвищення креатинкінази-МВ ).

Рівень сироваткових ферментів залишається в нормі при таких захворюваннях

• Склеродермия .
• Склеродактилія.
• Системний червоний вовчак.
• М'язова атрофія при неврологічних хворобах (наприклад, поліомієліт, поліневрит ).
• гіпертиреоїдних міопатія.

Зниження рівня сироваткових ферментів

• Ревматоїдний артрит (у 2/3 пацієнтів).

Захворювання скелетної мускулатури з підвищенням рівня креатинкінази-МВ

• Наркотики (наприклад, кокаїн, іпекак, галотан — злоякісна гіпертермія).
• Алкоголь.
• дерматомиозитом / поліміозиту.
• М'язові дистрофії Дюшенна і Беккера.
• Міопатія, викликана фізичними навантаженнями, різке підвищення у 14-100% осіб після високих навантажень (наприклад, марафонський біг), в меншій мірі — у добре підготовлених спортсменів.
• Сімейний гипокаліємічеський періодичний параліч.
• Ендокринні розлади (наприклад, гіпопаратіреоідізм, акромегалія, гіпотиреоз рідко викликає підвищення рівня креатинкінази-МВ: до 6% всіх випадків).
• Рабдоміоліз.
• Травми скелетної мускулатури (важкі).
• Інфекція:

1. вірусна (наприклад, ВІЛ, віруси Епштейна — Барр, грипу , пікорнавіруси, вірус Коксакі, ЕСНО-віруси, аденовіруси),
2. бактеріальна (наприклад, Staphylococcus, Streptococcus, Clostridium, Borrelia),
3. мікози,
4. паразитарна (наприклад, трихінельоз, токсоплазмоз, шистосомоз, цистицеркоз).

1. Вроджені (спадкова) міопатії (немаліновая, центронуклеарная).
2. Дистрофії, включаючи Дюшенна і Беккера, плечолопатковий-лицьова, тазового пояса, міотонічна.
3. Запальні, включаючи інфекційні (наприклад, трихінельоз), гранулематозні (наприклад , саркоїдоз ) і аутоімунні (наприклад, дерматоміозіти ).
4. Спадкові метаболічні міопатії.
5. Глікогенози (типи II, III, V, VII).
6. Порушення метаболізму ліпідів ( дефіцит карнітину в м'язах).
7. Травма.
8. Метаболічні, включаючи ендокринні

• Гіпотиреоз (рідко асоціюється з міотонію): 4-8-кратне перевищення верхніх меж норми сироваткової загальної креатинкінази у 60-80% пацієнтів, нормалізується рівень креатинкінази через 4-6 тижнів після лікування, креатинкиназа -МВ рідко підвищується у менш 6% пацієнтів, інші сироваткові ферменти в нормі, знижений рівень креатину в сечі, збільшена толерантність до креатину.

• Гипертиреоз : рівень сироваткових ферментів в нормі, підвищений креатин сечі, знижена толерантність до креатину, показники біопсії м'язів в нормі. Гіпертиреоз може бути причиною гіпокаліємічну періодичного паралічу.

• Акромегалія : 2-кратне перевищення верхніх меж норми сироваткової креатинкінази.

• Синдром Кушинга і терапія адренокортикостероїдами : рідко — підвищення сироваткових ферментів, може бути при первинному захворюванні, м'язова біопсія — дегенеративні та регенеративні зміни в окремих м'язових волокнах, відсутня запальна клітинна інфільтрація, підвищений креатин сечі.

• Інші ендокринопатії (наприклад, гіпофункція надниркових залоз, гіперпаратиреоз),

Спадкові м'язова дистрофія — по зчеплення з Х-хромосомою типом міопатія (ген захворювання картирован на Х-хромосомі, локус Хр21) виникає в результаті мутації гена дистрофина. Хвороба Беккера з відсутністю синтезу дистрофина — варіант дистрофії Дюшенна.

У діагностиці м'язової атрофії не мають діагностичного значення сироваткові ферменти у пацієнтів, які отримують імуносупресивну терапію, у яких причина м'язової слабкості неясна і потрібно біопсія м'язів.

Аналізи при спадкової м'язової дистрофії

Сироваткові ферменти при м'язової дистрофії (найбільш корисно визначення загальної креатинкінази ) підвищені.

• Молоді пацієнти: найвищі рівні сироваткових ферментів ( менше 50-кратне перевищення норми) на початку захворювання у немовлят (ранній дитячий вік) і в дитячому віці з поступовим поверненням в норму.
• Пацієнти з швидко прогресуючою дистрофією (по типу дистрофії Дюшенна): показники сироваткових ферментів при м'язової дистрофії можуть бути незначно підвищені або підвищення може бути нестійким при конечностно-поясному і плечолопаткових-особовому типах міопатії.
• Активна рання фаза: підвищені рівні сироваткових ферментів при м'язової дистрофії нестійкі і залежать від віку пацієнта і тривалості захворювання. Ферменти можуть бути підвищені до початку клінічних проявів хвороби.
• Стероїдна терапія не впливає на підвищення ферментних показників.

Преклінічні діагностика дистрофий Дюшенна і Беккера при сімейної схильності здійснюється шляхом скринінгу.

• Сироваткова креатинкиназа завжди підвищена у хворих дітей (5-100-кратне перевищення верхньої межі норми дорослої людини), досягає піку до 2-річного віку і починає знижуватися при клінічних проявах хвороби. Стійкий нормальний показник креатинкінази фактично виключає цей діагноз. Початок дослідження: 2-3-й місяць життя (NB: в перші дні життя у дітей дуже високий рівень креатинкінази — це норма, до 4-го дня життя відбувається зниження до 3-кратної верхньої межі норми дорослої людини, в перший місяць життя опускається до 2-3-кратної норми дорослої людини, в перші 2 роки життя показники залишаються вищими, ніж у дорослих).
• Позитивні результати скринінгу новонароджених на м'язову дистрофію, отримані при дослідженні цілісної крові , повинні бути підтверджені дослідженням плазми. Креатинкіназа більше 3-кратною верхньої межі норми для даного віку хлопчиків характерна при дистрофії Дюшенна і більше 2-кратної норми — при дистрофії Беккера.
• Дистрофія за статевою ознакою — фактично єдина причина високого рівня креатинкінази у нормальних новонароджених хлопчиків. При дистрофії високі значення стійкі, а помилково-позитивні немає.
• Скринінг на м'язову дистрофію у новонароджених дівчаток скасований.
• Пренатальний скринінг на 18-20-й тижнях вагітності за допомогою плацентарної аспірації крові ембріона не використовується через часті помилково-позитивних і хибно-негативних результатів.

Клінічна діагностика м'язової дистрофії

• Креатинкіназа підвищена майже у всіх пацієнтів з дистрофією Дюшенна (в середньому 30-кратне перевищення верхньої межі норми) і дистрофію Беккера (зазвичай більше 10-кратне перевищення верхньої межі норми).
• Діагноз м'язової дистрофії сумнівний, якщо креатинкиназа в нормі. Найбільше підвищення характерно для хворих молодшого віку, до 7 років відбувається зниження креатинкиназа приблизно на 50%, зазвичай показник перевищує в 5 разів верхня межа норми, але в крайніх випадках буває і нижче. За винятком поліміозитом , креатинкиназа в межах норми або менше 5-кратного перевищення верхньої межі норми при інших міопатіях і нейрогенної атрофії.
• Іноді при дистрофії Беккера і конечностно-поясному типі міопатії спостерігається до 10 % від загальної кількості креатинкінази-МВ.
• Дистрофія Дюшенна: креатинкиназа-МВ (10-15% від загальної) підвищена у 60-90% пацієнтів, креатінкіназа- ВВ може бути незначно знижена, креатинкиназа-ММ є основною фракцією. Креатинкіназа-МВ може бути незначно підвищена (зазвичай менше 4%) у носіїв з підвищеною загальною Креатинкінази.
• Сироваткова АЛД підвищена приблизно у 20% пацієнтів з дистрофією Дюшенна.
• Сироваткова ЛДГ підвищена приблизно у 10% пацієнтів. ACT підвищена приблизно у 15% пацієнтів.

Ідентифікація жінок-носіїв дистрофії Дюшенна

• Креатинкіназа підвищена у жінок-носіїв, що мають двох або одного хворих синів і хворого родича чоловічої статі, приблизно в 70% випадків дистрофії Дюшенна і в 50% випадків дистрофії Беккера.
• Найвищий рівень і найбільша частота зустрічаються у молодих носіїв, причому тільки в дитинстві, хоча був відсутній в подальшому. Рівень може досягати 10-кратного перевищення верхньої межі норми, але зазвичай менше 3 норм — в середньому 1,5, значення частково збігаються з такими у жінок без даної патології. Тому необхідно вжити заходів обережності: забір крові робити після нормальної активності в післяобідній час або ввечері, але не після серйозних або тривалих навантажень, внутрішньом'язовихін'єкцій, у вагітних.
• Контрольні дослідження проводять тричі з інтервалом в 7 днів. У темношкірих пацієнтів показники вище, ніж у білошкірих.

Подальші дослідження:

• Білок дистрофії , підрахований методом вестерн-блот в біоптаті м'язової тканини, становить менше 3% при дистрофії Дюшенна і приблизно 3-20% (або аномальний) при дистрофії Беккера.
• Імунофлуоресцентний аналіз біоптату м'язової тканини використовується для підтвердження результатів вестерн-блот у чоловіків або для діагностики у жінок з підозрою на дістрофінопатію.
• Аналіз ДНК виявляє специфічну мутацію гена приблизно у 60% пацієнтів.
• Пренатальна діагностика м'язової дистрофії проводиться шляхом взяття зразків ворсин хоріона на 12-му тижні вагітності.
• Діагностика носіїв м'язової дистрофії
• діагностика і диференціальна діагностика м'язової дистрофії (наприклад, від конечностно-поясного типу дистрофії).

В биоптате м'язової тканини при м'язової дистрофії виявляється м'язова атрофія, але клітиннаінфільтрація відсутня.

Креатин сечі підвищено — знижений. Ці перепади менш виражені при конечностно-поясному і плечолопаткових-особовому типах дистрофії, ніж при дистрофії Дюшенна. ШОЕ зазвичай в нормі. Показники функції щитовидної залози в нормі. У більшості жінок-носіїв після 16 років дані лабораторних показників можуть свідчити про поразку міокарда.

Плече-лопаточно-лицьова дистрофія

Плече-лопаточно-лицьова дистрофія — аутосомно-домінантна, повільно прогресуюча дистрофія, викликана аномаліями в хромосомі 4q35. Починається в пізній юності, тривалість життя звичайна.

У 75% пацієнтів з плече-лопаткової-лицьової дистрофією сироваткова креатинкиназа перевищує триразово верхня межа норми, часто нормалізується до 50-річного віку.

Конечностно-поясна дистрофія

Конечностно-поясна дистрофія — гетерогенна група розладів у обох статей, аутосомно-рецесивний тип захворювання, що розвивається в другу 10-річчя життя, що приводить до інвалідності приблизно в 30-річному віці і до смерті близько 50 років.

У 70% пацієнтів з конечностно-поясної дистрофією сироваткова креатинкиназа перевищує 10-кратно верхня межа норми. Не використовується для виявлення носіїв.

не використовується для розрізнення від інших аутосомно-рецесивних форм дистрофії, міопатії або неврологічних розладів (наприклад, спадкова проксимальная спінальна м'язова атрофія). М'язова гістологія при конечностно-поясної дистрофії неспецифічна.

Міотонічна дистрофія

міотонічна дистрофія — аутосомно-домінантне захворювання, викликане мутацією в 19-й хромосомі. Розвивається в пізній юності, тривалість життя звичайна. Міотонія проявляється у вигляді порушення релаксації мускулатури.

Аналізи м'язової дистрофії

• у 50% пацієнтів з миотонической дистрофією сироваткова креатинкиназа в нормі або приблизно триразово перевищує верхню межу норми.
• у сечі час від часу може виявлятися підвищений креатин.
• Відзначаються свідоцтва про атрофію яєчок і дефіциті андрогенних гормонів.
• 17-кетостероїди сечі знижені.
• Функція щитовидної залози знижена.
• Лабораторні показники при диференціальної діагностики деяких м'язових захворювань